Bir Hücre Üretim Tesisinde Nöronal Kök Hücre Kültürlerinin İşlenmesi

Nöronal kök hücre kültürlerinde kontaminasyonu en aza indirmek için, her biri hava geçirmez kapılarla ayrılmış laminer başlık, tampon odası, işlem odası ve mikroskop odası olan bir tesis kullanın.

Şimdi, nemi korumak için inkübatördeki bir kültür plakasına su doldurun.

Tampon odasını, proses odasını ve inkübatör parametrelerini optimum seviyelere ayarlayın.

Mikrobiyal kirleticileri ortadan kaldırmak için tüm yüzeyleri dezenfektan ve steril gazlı bezle temizleyin.

Nöronal kök hücre kültürü plakasını önce filtrelenmiş hava sağlayan laminer davlumbaza yerleştirin.

Plakanın dışını etanole batırılmış gazlı bezle silin ve ardından optimum gaz seviyeleri ile filtrelenmiş hava sağlayan tampon odasına aktarın.

Son olarak, plakayı işlem odasından inkübatöre taşıyın ve kapıyı kapatın.

İnkübasyondan sonra, kültür plakasını bir miktar taze ortamla birlikte işlem odasına geri taşıyın.

Taze ortamı dengeleyin.

Kültür plakasındaki ortamı yenileyin ve plakayı yeniden inkübe edin.

Her inkübatörün tabanındaki su kabına üç Petri kabı yerleştirin. Bu kapları steril suyla doldurun ve inkübatördeki bağıl nem ayar noktasını korumak için kritik öneme sahip oldukları için bu kaplardaki su seviyesini koruyun.

Grafik arayüzde, İnkübatör'e tıklayın. Ardından, ayar noktasının altındaki bağıl nem için mevcut değere tıklayın ve% 85 girin. Ardından, bu değeri kabul etmek için yeşil onay işaretine tıklayın.

Ardından, tampon odalarını, işlem odasını ve bir inkübatörü, tanıtılan hücre tipi için gereken gaz ayar noktalarına ayarlayın. İşlem odasının yüzeyini steril gazlı bez ve benzalkonyum klorür bazlı ürünler gibi yanıcı olmayan bir dezenfektan ile temizleyin.

Ardından eldivenleri ve kapı kolları gibi sık dokunulan yüzeyleri temizleyin. Ardından, laminer akış başlığının ve tampon odasının yüzeyini %70 etanol ile temizleyin ve kurumasını bekleyin.

Bundan sonra, şişeyi veya hücre plakasını davlumbazın içine yerleştirin ve dış yüzeyini etanol ile doyurulmuş steril bir gazlı bez süngerle kısaca silin. Ardından, şişeyi veya plakayı tampon odasına koyun ve bir seyreltme faktörü çalıştırın. Tamamlandıktan sonra, şişeyi veya plakayı hemen uygun inkübatöre aktarın.

İnkübatör işlem odasının arkasında olduğundan, hücre yerleşimi için işlem odasına bir raf çekin ve inkübatör kapılarını gereksiz yere veya uzun süre açmaktan kaçının.

Bu adımda, hücre kültürü ortamını hazırlayın. Ortam kabını 20 dakika boyunca hafifçe kapaksız bırakarak ortamın sistem içinde bulunan karbondioksit ve oksijen seviyeleri ile dengelenmesine izin verin.

Daha sonra eski ortamı kuyulardan çıkarın. Pluripotent kök hücreler için, besleme işlemi sırasında kurumayı önlemek için eski ortamın neredeyse tamamını az miktarda eski ortamdan çıkarın. Nöral kök hücreler için eski ortamın yarısını çıkarın. Daha sonra, hücre kültürü plakalarına taze ortam ekleyin ve plakaları belirlenen inkübatörlerine geri yerleştirin.