JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 6:24 dk. • July 8th, 2025
Hücre kültüründen türetilmiş şartlandırılmış bir ortamda insan nöral kök hücrelerinin üç boyutlu bir toplamı olan yapışık olmayan nörosferlerle başlayın.
Bu ortam, hücre canlılığını koruyan besinleri, büyüme faktörlerini ve hücre dışı matris bileşenlerini içerir.
Nörosferleri toplamak için santrifüjleyin.
Onları tripsin ve DNaz enzimleri ile muamele edin, içeriği karıştırın ve ardından inkübe edin.
Tripsin, hücreden hücreye yapışmayı bozar ve hücre ayrılmasını kolaylaştırırken, DNaz, hücre topaklanmasını önlemek için serbest DNA'yı bozar.
Tek hücreli bir süspansiyon oluşturmak için içeriği tekrar tekrar pipetleyin. Ardından, enzim aktivitesini nötralize etmek için bir tripsin inhibitörü ekleyin.
Süpernatanı santrifüjleyin ve çıkarın ve ardından hücreleri nöral büyüme faktörleri içeren bir proliferasyon ortamında yeniden süspanse edin.
Hücre süspansiyonunu, çok kuyucuklu bir plakaya yerleştirilmiş polimer kaplı bir lamel üzerine tohumlayın. Kök hücrenin polimere bağlanmasına izin vermek için inkübe edin.
Ayrıca, spesifik büyüme faktörlerinin emilmesine bağlı olarak, kök hücreler, özel hücre tiplerine daha fazla olgunlaşmaya hazır olan nöral ve astrosit progenitörlerine farklılaşır.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin