JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 6:26 dk. • July 8th, 2025
Bir Rho-kinaz inhibitörü ile desteklenmiş bir kök hücre ortamında insan kaynaklı pluripotent kök hücreler veya iPSC'ler içeren düşük bağlantılı bir kuyu plakası ile başlayın.
İnhibitörler hücrelere girer, Rho-kinaz enzimlerini bloke eder ve hücre canlılığını korur. Bu, iPSC agregalarının oluşumunu teşvik eder.
Agregaların büyümesine izin vermek için ortamı bir kök hücre ortamı ile değiştirin. Bunları kortikal indüksiyon ortamı ile düşük bağlantılı bir kültür kabına aktarın.
Bu ortamın bileşenleri, iPSC'lerin bir nöral öncü olan nöroektodermal hücrelere farklılaşmasına neden olur.
Her nöroektodermal agregayı sığ kuyucuklara sahip bir filme aktarın.
Ortamı bir bazal membran matrisi ile değiştirin ve matrisin katılaşmasına ve agregaların sıkışmasına izin vermek için inkübe edin.
Bu matrise gömülü agregaları kortikal indüksiyon ortamı içeren bir tabağa aktarın ve çalkalama ile inkübe edin.
Zamanla, nöroektodermal hücreler farklılaşma faktörlerini kullanır ve nöroepitel hücrelerine dönüşür.
Ortamı, hücrelerin daha özel hücre tiplerine olgunlaşmasına izin veren ve ön beyin korteksine benzeyen bir serebral organoid oluşturan bir organoid farklılaşma ortamına değiştirin.
Pluripotent kök hü
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin