İndüklenmiş Pluripotent Kök Hücrelerden Beyin Endotel Hücrelerinin Üretilmesi

Rho-kinaz inhibitörleri içeren bakım ortamında indüklenmiş bir pluripotent kök hücre veya iPSC kültürü alın.

Büyüme faktörleri hücreleri farklılaşmamış halde tutarken, rho-kinaz inhibitörleri hücre sağkalımını artırır.

Ortamı, rho-kinaz inhibitörlerini çıkararak yeni bakım ortamıyla değiştirin. Kuluçkaya yatırın, koloni oluşumunu teşvik edin.

Düzenli olarak, kontrollü bir ortam sağlayan, nöral progenitörlere ve ardından beyin endotel hücrelerine iPSC farklılaşmasını tetikleyen ve ardından hücre proliferasyonunu tetikleyen koşulsuz medya ile değiştirin.

Retinoik asit ve fibroblast büyüme faktörleri içeren endotel hücre ortamı ile değiştirin. Kuluçkaya yatmak.

Fibroblast büyüme faktörleri hücre proliferasyonunu kolaylaştırırken, retinoik asit beyin endotel hücre olgunlaşmasını destekler.

Hücreleri ayırmak için proteolitik enzimler ekleyin. Hücreleri toplayın ve santrifüjleyin. Süpernatanı atın.

Hücreleri endotel ortamında yeniden süspanse edin ve bunları kollajen ve fibronektin ile kaplanmış çok kuyulu bir membran ekine tohumlayın.

Kuyu endotel ortamı içerir. Seçici beyin endotel hücresi yapışması için inkübe edin.

Daha fazla deney için ortamı takviye edilmemiş endotel ortamı ile değ