Murin Periaortik Yağ Dokusundan Yağ Kaynaklı Kök Hücrelerin İzole Edilmesi
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:52 dk. • July 8th, 2025
Nöral krest hücrelerinden veya NCC'lerden türeyen floresan protein eksprese eden adipoz türevi kök hücreler içeren hasat edilmiş transgenik fare periaortik yağ dokularını alın.
Sindirim ortamı ekleyin ve dokuları kıyın.
Kıyılmış dokuyu sindirim ortamı ile bir tüpe aktarın. Parçaları mekanik olarak ayırın.
Kuluçkaya yatmak. Ortamdaki kollajenaz, dokunun hücre dışı matrisini sindirerek kök hücreleri, adipositleri ve fibroblastları serbest bırakır.
Kollajenaz aktivitesini durdurmak için serum içeren ortam ekleyin. Süpernatan içeren adipositleri santrifüjleyin ve atın.
Ortamdaki hücreleri yeniden askıya alın ve agregaları çıkarmak için filtreleyin.
Süzüntüyü santrifüjleyin ve süpernatanı çıkarın. Eritrositleri parçalamak için eritrosit lizis tamponundaki hücreleri yeniden süspanse edin.
Lizizi durdurmak için serum içeren tampon ekleyin. Süpernatanı santrifüjleyin ve atın.
Tampondaki hücreleri yeniden askıya alın.
Floresan kök hücreleri izole etmek için floresanla aktive edilen hücre sınıflandırması yapın.
İzole edilen kök hücreler daha ileri deneyler için kullanılabilir.
Hasat edilen yağ dokusunu, 1 mililitre taze hazırlanmış sindirim ortamı içeren yeni bir 2 mililitrelik mikrosantrifü
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin