JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:52 dk. • July 8th, 2025
Daha önce uzunlamasına kas ve myenterik pleksus, enterik nöronlar içeren katmanlar ve glial hücrelerden sıyrılmış bir fare ince bağırsak segmentini ele alalım.
Dokuyu kesin ve EDTA içeren bir tampona yerleştirin. Sallanarak kuluçkaya yatırın.
EDTA, epitel mukozasını altta yatan lamina propria ve submukozadan, enterik glial hücreler içeren bağ dokusu katmanlarından ayırarak hücre-hücre bağlantılarını bozar.
Epitel hücrelerini çıkarmak için tekrar tekrar pipetleyin.
Bir hücre süzgecinden süzün ve akışı atın.
Dokuyu enzimatik olmayan bir ayrışma tamponuna aktarın ve sallanarak inkübe edin. Ayrışma tamponu, lamina propria'yı ve submukozal hücre dışı matrisi gevşeterek hücreleri ayırır.
Hücreleri daha fazla ayırmak için tekrar tekrar pipetleyin.
Hücreleri toplamak için bir hücre süzgecinden süzün.
Hücreleri bir tamponda santrifüjleyin ve yeniden süspanse edin.
Glial bir büyüme ortamı içeren yapışma proteini kaplı kuyucukları alın ve hücreleri plakalayın.
Kaplama, hücre yapışmasını kolaylaştırırken, büyüme faktörleri seçici olarak glial hücre proliferasyonunu teşvik ederek bir lamina propria ve submukozal glial hücre kültürü oluşturur.
Epitel mukozasını çıkarmak için önce ince makas kull
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin