JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 5:34 dk. • July 8th, 2025
Bir sıçanın omurgasının bir bölümünü alın ve omuriliği çıkarmak için bölün.
Uydu glial hücreler veya SGC'ler ile çevrili bir nöron kümesi olan dorsal kök gangliyonlarını veya DRG'leri ayırın.
DRG'leri bir büyüme ortamına yerleştirin. SGC kontaminasyonunu azaltmak için sinir köklerini çıkarın.
Doku matrisini bozmak için kollajenaz ile muamele edin ve enzimleri çıkarmak için yıkayın.
Hücreler arası bağlantıları bozmak için tripsin ekleyin. Tripsini etkisiz hale getiren proteinler içeren bir serum ekleyin.
Büyüme ortamını ekleyin ve dokuyu mekanik olarak ayırın. Tek hücreleri izole etmek için süspansiyonu filtreleyin ve doku kalıntılarını gidermek için santrifüjleyin.
Hücreleri bir yoğunluk gradyan ortamı ve santrifüj üzerine katmanlamak için yeniden askıya alın.
Daha yüksek yoğunluğa sahip nöronlar dibe çökerek SGC'lerin ayrılmasını kolaylaştırır.
Nöronları bir kültür ortamında yeniden süspanse edin. Bunları, hücre bağlanmasına izin verecek şekilde kültür substratı kaplı bir kuyuya aktarın.
Nöronal sağkalım için sinir büyüme faktörleri ile takviye.
Omuriliği topladıktan sonra DRG nöronlarını elde etmek için, herhangi bir sırt parçasını çıkararak başlayın ve ardından omurgayı uzunlama
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin