Erişkin Bir Sıçanın Omurilik Periventriküler Bölgesinden Nöral Kök Progenitör Hücrelerin İzolasyonu
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:30 dk. • July 8th, 2025
Nöral kök / progenitör hücreler açısından zengin bir bölge olan yetişkin bir sıçanın omurilik periventriküler dokusu ile başlayın.
Dokuyu papain ve DNaz içeren bir çözeltiye aktarın.
Proteolitik bir enzim olan patain, dokunun hücre dışı matrisini parçalarken, DNaz, hasarlı hücrelerden salınan kontamine DNA'yı bozar.
Tek hücreli bir süspansiyon elde etmek için dokuyu mekanik olarak ayırın.
Süspansiyonu bir tüpe aktarın ve santrifüjleyin. Süpernatanı çıkarın. Hücreleri, albümin proteini ve bir proteaz inhibitörü içeren bir çözelti içinde yeniden süspanse edin.
Albümin ve inhibitör papain'i devre dışı bırakır.
Hücre süspansiyonunu albümin ve bir proteaz inhibitörü içeren bir çözelti üzerine katmanlayın.
Katmanlar arasındaki yoğunluk farkı, süreksiz bir yoğunluk gradyanı oluşturur.
Hücre zarı parçaları arayüzde kalırken, sağlam hücreleri yerleştirmek için santrifüjleyin.
Süpernatanı atın. Hücreleri büyüme ortamında yeniden süspanse edin ve plakalayın.
Büyüme faktörleri, nöral kök / progenitör hücrelerin çoğalmasını ve bunların üç boyutlu nöroküreler halinde toplanmasını seçici olarak teşvik eder.
Sıçan nöral kök hücrelerinin izolasyonuna başlamak için, diseke edilmiş periventriküler do
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin