Murin Primer Oligodendrositlerinin İmmünomanyetik Boncuklar Kullanılarak İzole Edilmesi

0 görüntüleme3:06 dk • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bir fare yavrusundan olgunlaşmamış oligodendrositler ve birincil nöronal hücreler dahil olmak üzere bir nöral hücre süspansiyonu alın.

Hücre topaklanmasını önlemek için hücreleri manyetik bir hücre sıralama tamponunda yeniden askıya alın.

Yüzeylerine anti-O4 antikorları taşıyan tasarlanmış manyetik mikro boncuklar ekleyin. Homojen bir karışım sağlamak için çözeltiyi çalkalayın.

Mikroboncukların, oligodendrositler üzerinde bir O4 antijeni olan sülfatlanmış galaktolipid ile bağlanmasını sağlamak için inkübe edilirken, diğer hücreler bağlanmamış veya gevşek bir şekilde bağlı kalır.

Karışımı ek hücre sıralama tamponu ile yıkayın.

Süpernatanı santrifüjleyin ve atın, ardından hücreleri yeniden askıya alın.

Ardından, boncuk bağlı hücreleri, daha büyük hücre kümelerini ortadan kaldıran bir filtre ile donatılmış manyetik bir ayırma kolonuna geçirin.

Çalışma sırasında, bir manyetik alan altında, boncuk bağlı kompleksler mıknatısa doğru hareket eder ve yanlara yapışır.

Bağlanmamış ve gevşek bağlı hücreleri çıkarmak için yıkayın.

Kolonu ayırıcıdan alın ve gelecekteki uygulamalar için birincil oligodendrositleri toplamak için bir proliferasyon ortamı ile yıkayın.

Saydıktan sonra, hücreleri tekrar santrifüjleyin ve peleti 1 x 107 hücre başına 90 mikrolitre taze manyetik hücre sıralama tamponunda yeniden süspanse edin. Daha sonra, 1 x 107 hücre başına 10 mikrolitre anti-O4 boncuk ekleyin ve hücre çözeltisini hafifçe hafifçe vurarak karıştırın. 4 santigrat derecede 15 dakika sonra, hafifçe hafifçe vurarak, her 5 dakikada bir, santrifüjleme ile yıkamak için 1 x 107 hücre başına 2 mililitre manyetik hücre sıralama tamponu ekleyin ve süpernatanı dikkatli bir vakum aspirasyonu ile atın.

Peleti her 1 x 107 hücre için 500 mikrolitre taze manyetik hücre sıralama tamponunda yeniden süspanse edin ve karşılık gelen manyetik ayırıcısına uygun boyutta bir manyetik boncuk sıralama sütunu yerleştirin. Kolonun üzerine 40 mikronluk bir süzgeç yerleştirin ve süzgeci 3 mililitre manyetik hücre ayırma tamponu ile önceden durulayın, böylece kolonun kurumasına izin vermeden tamponun kolondan geçmesine izin verin. Hücreleri süzgecin içine ekleyin, ardından manyetik hücre sıralama tamponu ile 1 mililitrelik bir yıkama yapın.

Kolonu yıkama başına 3 mililitre manyetik hücre ayırma tamponu ile üç kez ve oligodendrosit proliferasyon ortamı ile bir kez yıkayın. Ardından, kolonu 15 mililitrelik bir tüpe aktarın ve pistonu 5 mililitre taze oligodendrosit proliferasyon ortamını kolondan hemen boşaltmak için kullanın.

09:05

Oligodendrocytes ve Oligodendrocyte-Ko-Kültür Deneyleri için Şartlı Orta Üretimi

İlgili videolar

0 Görüntüler

04:53

Fare Primer Mikroglia'sının Hayvan Demiyelinasyon Modellerinde Manyetik-Aktif Hücre Sıralama ile İzolasyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:49

Yetişkin Otoimmün Ensefalomiyelit Farelerinden Başlıca Merkezi Sinir Sisteminde Yerleşik Hücre Tiplerinin Eşzamanlı İzolasyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

04:45

Mikroglia'nın Fare Yavrusu Beyinlerinden Manyetik İzolasyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

03:48

Mikroglia'nın Yetişkin Bir Fare Beyninin Korteksinden İzolasyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

04:09

Manyetik Aktif Hücre Sıralaması Kullanılarak Fare Beyni Demiyelinizan Lezyonlarından Mikroglia'nın İzole Edilmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:21

Karakterizasyonu ve yoğunluk Gradient Santrifüjü tarafından fare birincil Microglia izolasyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:32

Fare birincil Oligodendrocytes hızlı ve spesifik Immunomagnetic izolasyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:49

Derin Tek Hücreli RNA Sıralamaiçin Bir Yetişkin Fare Beyin Yarımküre'den Bölgeye Özgü MikrogliaNın İzolasyon

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:00

Murine glia'nın Multipl Merkezi Sinir Sistemi Bölgelerinden Diseksiyonu ve İzolasyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 15 Ağustos 2026