Schwann Hücre Fenotiplerini İncelemek için Mikrodesenli Bir Substratın Hazırlanması

Hücreleri tanımlanmış bir şekilde büyütmek için istenen geometriye sahip mikro desenlere sahip bir silikon gofret alın.

Üzerine bir polimer karışımı dökün ve katılaşmasına izin verin.

Polimerin kare bir damgasını kesin.

Damganın desenli yüzeyini, hücre bağlanmasını kolaylaştıran bir protein tabakası ile kaplayın.

Bir hava akımı kullanarak, bağlanmamış proteinleri çıkarın.

Polimer kaplı bir lamel alın.

Damganın desenli tarafını üzerine yerleştirin.

Deseni aktarmak için damgaya basın. Damgayı çıkarın.

Lameli çıplak yüzeyleri kaplamak için bir yüzey aktif madde içeren bir kuyuya aktarın. Bu, yüzey hidrofobikliğini artırarak istenmeyen hücre yapışmasını önler.

Yüzey aktif maddeyi çıkarın ve bir fosfat tamponu ile yıkayın.

Schwann hücrelerini ekleyin ve mikro desene bağlanmalarına izin verin.

Bağlanmamış hücreleri çıkarmak için bir tamponla yıkayın.

Kültür ortamı ekleyin ve inkübe edin.

Hücreler yüzey boyunca büyüdükçe, mikro desen şeklini alırlar ve bu da Schwann hücre fenotipinin incelenmesini sağlar.

Mikro desenli bir alt tabaka hazırlamak için, 150 milimetre çapında ve 15 milimetre yüksekliğinde dairesel bir Petri kabının içine desenli bir silikon gofret yerleştirin ve gazı alınmış