JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:45 dk. • July 8th, 2025
Bir sinir kökü alın ve küçük parçalar halinde doğrayın.
Sindirim enzimi içeren bir tüpe aktarın ve inkübe edin.
Enzim hücre dışı matrisi sindirir.
Sindirimi durdurmak için serum içeren besiyeri ekleyin.
İçeriği tekrar tekrar pipetleyin, ardından süpernatanı santrifüjleyin ve atın.
Peleti yeniden askıya alın.
Sindirilmemiş dokuyu çıkarmak için süspansiyonu bir süzgeçten geçirin. Toplanan hücreleri bir tabakta inkübe edin.
Fibroblast ve Schwann hücreleri veya SC'ler plakaya bağlanır ve bölünür.
Eklenmemiş hücreleri çıkarın. Bağlı hücreleri bir fosfat tamponu ile yıkayın.
Sindirime duyarlı SC'leri gevşetmek için sindirim enzimleri ekleyin. Medya ile sindirimi durdurun.
Ortam ekleyerek SC'leri tamamen ayırın.
Hücreleri bir tüpe aktarın ve santrifüjleyin. Süpernatanı atın ve SC'ye özgü ortamdaki hücreleri yeniden süspanse edin.
Hücreleri kaplanmamış bir plakaya aktarın ve inkübe edin.
Kalan fibroblastlar yapışacak ve SC'leri süspansiyon halinde bırakacaktır.
Süspansiyonu matris kaplı bir plakaya aktarın.
Schwann hücresinin bağlanması ve bölünmesi için kuluçkaya yatırın.
Sinirleri makasla 3 ila 5 milimetrelik parçalar halinde kesin. 1 mililitre% 0.25 tripsin ekleyin ve sinir parçalarını
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin