JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:19 dk. • July 8th, 2025
Enzimatik olarak sindirilmiş fare siyatik sinir liflerinden bir hücre süspansiyonu ve döküntü alın.
Bir süzgeçten geçirerek kalıntıları temizleyin.
Süzüntüyü santrifüjleyin ve süpernatanı çıkarın.
Hücreleri serum içeren ortamda yeniden süspanse edin ve bunları bir yapışma proteini kaplı kültür plakasına tohumlayın.
Hücre yapışması için inkübe edin. Ortamı Schwann hücre ortamıyla değiştirin. Schwann hücresi tek tabaka oluşumu için inkübe edin.
Ortamı çıkarın ve tampon ile yıkayın. Hücreleri ayırmak için tripsin ile inkübe edin.
Enzimatik aktiviteyi durdurmak için serum içeren ortam ekleyin.
Hücreleri toplayın ve santrifüjleyin. Süpernatanı atın.
Hücreleri tamponda yeniden süspanse edin ve antikor kaplı manyetik mikro boncuklar ekleyin.
Antikorları fibroblast glikoproteinlerine bağlamak için inkübe edin.
Süpernatanı santrifüjleyin ve atın. Hücreleri tamponda yeniden askıya alın ve bunları manyetik ayırıcının manyetik alanına yerleştirilmiş ferromanyetik küreler içeren bir manyetik ayırma kolonuna yükleyin.
Manyetik alan, mikroboncuklara bağlı fibroblastları tutar ve Schwann hücrelerinin akışta toplanmasına izin verir.
Sindirilmiş sinirleri 50 mililitrelik bir tüpe aktarın ve 188 g'da
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin