Bir Fare Beyninden Amigdala Bölgelerini Açığa Çıkaran Koronal Beyin Dilimi Oluşturma

Buz gibi soğuk bir tamponda bir fare beynini alın ve beyincik içeren arka kısmını ve medial prefrontal korteks veya mPFC ile ön kısmını çıkarın.

Orta kısım, korku ve endişe gibi duyguları işleyen amigdala bölgelerini içerir.

Fazla tamponu çıkarmak için beyin bölümünü bir filtre kağıdına taşıyın.

Bir sahneye yapıştırın ve dilimleme sırasında hareketini önlemek için bölümün arkasına bir agar bloğu sabitleyin.

Bu aşamayı buz gibi soğuk tamponlu bir vibratom kesme odasına yerleştirin.

İnce bir koronal beyin dilimi elde etmek için bölümü kesin.

Bu, amigdala nöronları ile amigdala tepkilerini düzenleyen mPFC nöronlarının projeksiyonları arasında sinaptik bağlantılar içeren amigdala bölgelerini ortaya çıkarır.

Dilimi, her biri bir amigdala bölgesi içeren iki yarıya kesin.

Daha sonra, bunları oksijenli yapay beyin omurilik sıvısı içeren bir arayüz odasına aktarın.

Nöronal canlılığı korumak için dilimleri fizyolojik sıcaklıkta geri kazanın.

Beyni elde ettikten sonra, beyincik ve beynin iç kısmını çıkarmak için bir neşter kullanın ve ardından beynin orta kısmını daha önce olduğu gibi buz gibi soğuk kesme solüsyonunda soğutun. Beyni filtre kağıdı ile kurulayın ve ardından vibratom aşamasına yapıştırın.

Yine, dilimleme sırasında stabilite için beynin arkasına ek bir agar bloğu sabitleyin. Sahneyi 4 santigrat derece kesme çözeltisi ile doldurulmuş kesme haznesine yerleştirdikten sonra, amigdala boyunca 320 mikronluk koronal kesitler kesin. Bunları ikiye bölün ve daha önce olduğu gibi arayüz odasındaki bölümleri toplayın.