Hücre Kaderi Nematod Germ Hücrelerinin Nöronlara Yeniden Programlanması
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:59 dk. • July 8th, 2025
Genetiği değiştirilmiş bakterileri bir nematod büyüme ortamında ele alalım.
Bakteriler, nematod kromatin düzenleyici faktör genine sahip bir plazmit taşır.
Ortam, kromatin düzenleyici faktör genini bir dsRNA'ya kopyalayan bakteri genomundan bir transgenik RNA polimerazın ekspresyonunu tetikleyen bir indükleyici içerir.
Bir ısı şoku promotörü altında nöron kaderini indükleyen bir transkripsiyon faktörü geni taşıyan transgenik nematod larvalarını ekleyin.
Bakteri tüketimi üzerine, yutulan dsRNA, kromatin düzenleyici faktör ekspresyonunu aşağı regüle eden ve hücre kaderinin yeniden programlanmasını kolaylaştıran siRNA üretir.
Ebeveynlerin germ hücreleri aracılığıyla, siRNA döllere geçer.
Çıkıntılı bir vulva fenotipi ile gösterilen döl germ hücrelerindeki kromatin düzenleyici faktör ekspresyonunun aşağı regülasyonu, bunların yeniden programlanmasına izin verir.
Döllere ısı şoku uygulayın, ısı şoku promotörü aktive edin ve nöronal farklılaşmayı tetikleyen, germ hücrelerini nöronlara dönüştüren nöron kaderini indükleyen transkripsiyon faktörünü ifade edin.
Nöronlar, mikroskobik görselleştirmeyi kolaylaştıran transgenik bir floresan raportör proteini eksprese eder.
Replika başına 50 L4 so
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin