JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 5:00 dk. • July 8th, 2025
Perfüze edilmiş sıçan hipokampus parçalarını alın.
Dokunun hücre dışı matrisini sindirmek ve nöronlar, astrositler ve mikroglia dahil olmak üzere hücreleri gevşetmek için papain ile kuluçkaya yatırın.
DNase ekleyin ve karıştırın.
Tek hücreli bir süspansiyon elde etmek için giderek azalan çaplara sahip pipetler kullanarak dokuyu mekanik olarak ayırın. DNazın kirletici DNA'yı parçalaması için inkübe edin.
Süspansiyonu bir süzgeçten geçirerek kalıntıları temizleyin.
Enzimatik aktiviteyi durdurmak için iki değerlikli iyonlar içeren tampon ekleyin.
Enzim açısından zengin süpernatanı santrifüjleyin ve çıkarın.
Şimdi, tampon ve anti-miyelin manyetik boncuklar ekleyin. Boncukların miyelin kalıntılarını bağlaması için kuluçkaya yatırın.
İnkübasyondan sonra, süpernatanı santrifüjleyin ve çıkarın.
Karışımı tampon içinde yeniden süspanse edin ve manyetik sıralayıcının manyetik alanına yerleştirilmiş ferromanyetik küreler içeren bir manyetik ayırma kolonuna yükleyin.
Manyetik alan, miyelinsiz hücreler geçerken kolondaki manyetik boncuk bağlı miyelin kalıntılarını tutar.
Kolonu tamponla yıkayın ve nöronlar, astrositler ve mikroglia içeren akışı toplayın.
Yetişkin beyin dokularından toplanan her
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin