JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 5:29 dk. • July 8th, 2025
Fare omuriliklerini hasat edin ve parçalara ayırın.
Parçaları bir proteolitik enzim ve DNaz içeren bir tüpe aktarın. Girdap ve kuluçkaya yatırın.
Enzim, dokunun hücre dışı matrisini sindirirken, DNaz, kirletici serbest DNA'yı bozar.
Tekrar vorteksleyin ve doku ayrışmasını tamamlamak için tekrar tekrar pipetleyin ve tek hücreli bir süspansiyon elde edin.
Süpernatanı santrifüjleyin ve çıkarın. Hücreleri DNaz ve bir proteaz inhibitörü ve girdap içeren bir çözelti içinde yeniden süspanse edin. İnhibitör enzimi nötralize eder.
Üstüne taze inhibitör solüsyonu koyun, santrifüjleyin ve süpernatanı çıkarın.
Hücreleri yoğunluk gradyan ortamında, girdapta ve ardından santrifüjde yeniden askıya alın.
Hücreler dibe çökerken, miyelin kalıntıları üstte kalır.
Kalıntıları atın. Tampon, santrifüj ile tekrar tekrar yıkayın ve süpernatanı çıkarın. Büyüme ortamındaki hücreleri yeniden süspanse edin.
Hücreleri plakalayın. Kaplamasız yüzey, glial hücre bağlanmasını kolaylaştırır.
Harcanan ortamı çıkarın ve glial hücre proliferasyonunu indüklemek için taze ortam ekleyin ve karışık bir glial kültür oluşturun.
Bir doku kültürü başlığında çalışarak, dört fare omuriliğini bir HBSS Petri kabına aktarın. Omuri
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin