İnsan Kornea Fibroblastları ve Nöronlarının 3 Boyutlu Ko-Kültür Modelinin Oluşturulması

İnsan kornea fibroblastlarını ele alalım.

Bunları, ortam içeren çok kuyulu bir plaka içindeki bir membran ekine aktarın.

Membran ekine ortam ekleyin. Eke fibroblast yapışması için inkübe edin.

Ardından, ortamı zar ekinde ve rezervuarda C vitamini içeren ortamla değiştirin.

Kuluçkaya yatmak. C vitamini, fibroblastları 3 boyutlu hücre dışı bir matris salgılaması ve bir araya getirmesi için uyarır.

Fibroblastların üzerine bir insan nöroblastom hücre süspansiyonu ekleyin.

Nöroblastom hücre yapışmasına izin vererek inkübe edin.

Şimdi, hücrelerin üzerine retinoik asit içeren besiyeri ekleyin ve rezervuarı taze besiyeri ile destekleyin.

Kuluçkaya yatmak. Retinoik asit, nöroblastom hücresinin nöral progenitör hücrelere farklılaşmasını tetikler.

Ardından, medyayı çıkarın. Rezervuara taze ortam ekleyin. Membran ekine nörotrofik faktör içeren bir ortam ekleyin ve inkübe edin.

Nörotrofik faktörler, progenitör hücrelerin nöronlara farklılaşmasını tetikleyerek insan kornea fibroblastları ve nöronlarının 3 boyutlu bir ko-kültür modelini oluşturur.

3D yapıları bir araya getirmek için önce insan kornea fibroblastlarını geçirin ve sayın. Daha sonra, 0,4 mikron gözenekli bir polikarbonat membran eki