Kitle Sitometrisini Görüntülemek için Doku İmmün Boyama

Sabit bir doku örneği içeren bir cam slaytı bir antijen alma tamponuna yerleştirin ve ısıtın.

Yüksek sıcaklık ve tamponun alkalin pH'ı, fiksasyonun neden olduğu protein çapraz bağlarını kırarak antijen epitoplarını açığa çıkarır.

Isıya bağlı doku hasarını önlemek için slaytı soğutun, ardından fazla tamponu çıkarmak için durulayın.

Hidrofobik bir bariyer uygulayın ve slaytı bir nem odasına yerleştirin.

Geçirgenliği engelleyen bir arabellek ekleyin. Tamponun deterjanı hücresel zarları geçirgen hale getirir ve bloke edici proteinler, arka plan lekelenmesini azaltmak için spesifik olmayan bağlanma bölgelerini maskeler.

Fazla tamponu çıkarın, metal konjuge bir antikor kokteyli ekleyin ve antikorun spesifik antijenlere bağlanmasına izin vermek için inkübe edin.

Slaytı yıkayın, bağlanmamış antikorları çıkarın.

Hücrelere giren ve DNA'ya bağlanan metal konjuge bir nükleer leke ekleyin.

Fazla lekeyi durulayın ve slaytı kurulayın.

Optik bir tarayıcı kullanarak, lekeli numunenin görüntüleme kütle sitometrisi analizinden elde edilen verilerin yorumlanmasına yardımcı olan dokunun yapısal özelliklerinin yüksek çözünürlüklü görüntülerini elde edin.

İmmün boyama uyumlu bir slayt üzerine monte edilm