Nöronal Hücrelerden Protein Ekstraksiyonu

0 görüntüleme1:58 dk • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bir lamel üzerine tutturulmuş nöronal kanser hücreleri içeren bir hücre kültürü alın ve soğuk koşullar altında koruyun.

Kültür ortamını çıkarın ve artık ortamı ortadan kaldırmak için hücreleri tekrar tekrar soğuk fosfat tamponu ile yıkayın.

Düşük konsantrasyonda iyonik olmayan deterjan ve proteaz inhibitörleri içeren bir lizis tamponu ekleyin.

İyonik olmayan deterjan, lizizi başlatmak için hücre zarını bozar.

Bu arada, proteaz inhibitörleri hücresel proteolitik enzimleri bloke ederek proteinleri enzimatik bozulmadan korur.

Ardından, kısmen parçalanmış hücreleri lamel üzerinden çıkarmak için bir hücre kazıyıcı kullanın.

İçeriği lizis tamponu içeren bir tüpe aktarın.

Soğuk koşullar altında, hücreleri mekanik olarak parçalamak için bir homojenizatör kullanın, tam hücre lizizini ve protein salınımını sağlayın.

Hücre lizatını santrifüjleyin.

Süpernatanı yeni bir tüpe toplayın.

Nöronal tümör hücrelerinden ekstrakte edilen proteinler artık daha fazla analiz için hazırdır.

Protein ekspresyonunun doğrulanması için, transfeksiyondan 48 saat sonra, kültür kaplarını buzun üzerine yerleştirin ve hücreleri PBS ile iki kez yıkayın. Her tabaktaki hücrelere 200 ila 400 mikrolitre lizis tamponu uygulayın ve hücreleri lamellerden çıkarmak için bir hücre kazıyıcı kullanın.

Ayrılan hücreleri her bir plakadan ayrı mikrosantrifüj tüplerine aktarın ve hücreleri buz altında bir homojenizatör ile daha da ayırın. Bir dakika sonra, homojenize hücre parçalarını santrifüjleme ile peletleyin.

10:37

Kombine nükleotit ve Caenorhabditis elegans Protein çekimi

İlgili videolar

0 Görüntüler

12:07

FAHD1 Proteininin Domuz Böbreği ve Fare Karaciğerinden Ekstraksiyonu ve Saflaştırılması

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:58

İnsan Postmortem Beyin Dokusu Nöronal Çekirdekler İzolasyon

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:51

Sıçan Embriyonik Nöral Hücre İzolasyonu ve Kültür: Bir Hızlı Protokol

İlgili videolar

0 Görüntüler

12:38

Kültür farklılaştırılmış insan Neuroprogenitor Hücreler Nöronlar Lazer Yakalama Mikrodisseksiyon

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:29

Pankreas Nöroplastisite benzetme: In Vitro Dual-nöron Plastisitesi Deneyi

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:51

Konsensus Beyin kaynaklı protein, 2D-DIGE ve Mini 2DE İmmünoblotting Hem kullanma İnsan ve Kemirgen Beyin proteomun Çalışmaları Ekstraksiyon Protokolü

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:49

Yenidoğan Faresinden İzole Edilen Spinal Kord Nöronları İzolasyonu ve Kültürü

İlgili videolar

0 Görüntüler

11:39

Primer Nöral Kök ve Progenitor Hücrelerinin Hücre Yüzey Belirteçlerinin Sialoglycan'ın Metabolik Etiketlemesi ile Belirlenmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:39

Mutant Metiyonin tRNA Sentetaz Fare Hattı Kullanılarak Hücre Tipi Özgül Protein Saflaştırma ve Kompleks Dokulardan Tanımlama

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 1 Ağustos 2026