JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:45 dk. • July 8th, 2025
Giriş ve çıkış portlarına bağlı birden fazla küçük kanala sahip bir silikon matris içeren bir çanak ile başlayın.
Kanalları doldurmak için giriş boyunca itici aktiviteye sahip test proteinini enjekte edin.
Kanal alanında protein yapışmasına izin vermek için inkübe edin, test protein bölgeleri oluşturun, ardından yıkayın.
Matrisi çıkarın, kaplanmış alanı çekici aktiviteye sahip bir kontrol proteini ile kaplayın ve inkübe edin.
Bu, kontrol proteininin test proteini bölgeleri arasındaki boş alanlara yapışmasını kolaylaştırır, alternatif çizgili bir desene sahip kontrol proteini bölgeleri oluşturur, ardından yıkayın.
Çizgili alanı kaplamak için laminin ekleyin, ardından yıkayın.
Kaplanmış alanı tek hücreli hipokampal nöron süspansiyonu ile tohumlayın ve inkübe edin.
Test proteini bölgesinde, nöronlar proteinlerle etkileşime girer ve nöronların itilmesine neden olan sinyalleri tetikleyerek bağlanmalarını engeller.
Buna karşılık, kontrol protein bölgesindeki nöron-protein etkileşimleri, büyümelerini ve akson uzantılarını destekleyerek nöronal bağlanmayı teşvik eder.
PBS'de floresan etiketli rekombinant proteinleri hazırlayın. Her şeritli tabak için 25 mikrolitre yapın. Karışımı oda sıcak
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin