JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:15 dk. • July 8th, 2025
Anestezi uygulanmış bir sıçan alın ve refleksleri uyuşturmak için gözüne anestezik uygulayın.
Kontaminasyonu önlemek için bıyıkları kesin ve göz çevresindeki alanı dezenfekte edin.
Mikroskop altında, episkleral veni açığa çıkararak gözü şişirmek için alt göz kapağını sıkıştırın.
Bu damar, sulu hümörün dışarı akışı için Schlemm kanalı ve trabeküler ağ örgüsü yoluyla ön kamaraya bağlanır.
Açıkta kalan damara hipertonik salin içeren bir mikroiğne yerleştirin.
Kanın yerini alarak salini enjekte edin. Göz boyunca homojen bir etki için birincinin karşısına ikinci bir enjeksiyon yapın.
Tuzlu su trabeküler ağa girer.
Yüksek tuz konsantrasyonu ozmotik strese neden olarak hücre ölümüne ve doku skarlaşmasına yol açar. Bu yara izi, ağ örgüsünden sulu hümör çıkışını engelleyerek göz içi basıncını arttırır.
Yüksek basınç, beyne görsel bilgi taşıyan nöronlar olan retinal ganglion hücrelerine zarar verir. Hasar, görme kaybına neden olan bir durum olan glokoma yol açar.
Bu prosedürde, hayvanı KAX kokteyli ile uyuşturduktan sonra, hayvanın bilinçsiz olduğundan emin olmak için ayaklarına veya kuyruğuna çimdikler vererek refleksleri kontrol edin. Ardından bıyıkları makasla kesin. Daha sonra, bir pamuk uçlu aplikatörü betadin çözeltisi ile doyurun ve deneysel gözün etrafındaki alanı temizleyin.
Mikroskop altında, gözü şişirmek, episkleral veni ortaya çıkarmak ve göz hareketini kısıtlamak için alt göz kapağını klemplemek için bir hemostat kullanın. Daha sonra, episkleral damarı mikro iğne ile damara 10 ila 20 derece arasında bir açıyla dikkatlice delin. Kanın mikro iğnenin ucuna girdiği gözlemlendiğinde damar içine bir delik açılması başarılı olur.
Yavaşça damar içine 50 mikrolitre salin enjekte edin. Tuz damar sistemi boyunca dolaşırken damarlar beyazlaşır, ancak bazı bölgeler kan kırmızısı bir görünüm koruyabilir.
Bu prosedürdeki en kritik adım, iki molar salinin enjeksiyonu sırasında gerçekleşir. Başarılı bir sonuç elde etmek için damar sisteminde ağartmanın meydana gelmesi zorunludur. İğneyi 20 derecelik bir açıyla sabit tutmak bu prosedür için çok önemlidir.
Bundan sonra, retinal ganglion hücre tabakasının tamamen hasar görmesini sağlamak için damar içine ikinci bir enjeksiyon yapın. Dakikalar içinde, tuz vasküler sistemde dolaşırken gözün irisi boyunca belirgin bir bulanık görünüm görülmelidir.