Periventriküler Endotel Hücrelerinden Kemoçekici İpuçlarına İnternöron Yanıtının Değerlendirilmesi
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:19 dk. • July 8th, 2025
Hücre bağlantısı için polimer kaplı bir tabağa üç bölmeli bir kültür ekini sabitleyin.
Çanağı ters çevirin, orta bölmeyi işaretleyin ve yeniden yönlendirin. Bu bölmeye internöron içeren bir ortam ekleyin.
Dış bölmelerden birine insan periventriküler endotel hücreleri veya PVEC'ler, beyin damarı hücreleri içeren bir ortam ekleyin.
Başka bir dış bölmede, kontrol olarak periventriküler olmayan endotel hücreleri içeren bir ortam ekleyin.
Polimer kurumasını önlemek için tabağa bir ko-kültür ortamı ekleyin. Hücre yapışması için inkübe edin.
Her hücre tipi arasında küçük hücresiz boşluklar bulunan dikdörtgen hücre yamaları oluşturarak eki sökün.
Ko-kültür ortamı ile tazeleyin ve inkübe edin.
Endotel hücreleri, internöronların hücresiz alanlara göç etmesini tetikler.
Bu arada, PVEC'ler, internöronların PVEC içeren yamaya doğru göçünü artıran kimyasal cezbedici maddeler salgılar.
PVEC yamasına doğru kontrol hücresi yamasından daha yüksek internöron göçü, PVEC'lerden gelen kemoçekici ipuçlarına internöron yanıtını doğrular.
Kemorezivasyon testini gerçekleştirmek için, poli-L-ornitin ve laminin kaplı 35 milimetrelik bir tabağın ortasına üç oyuklu bir kültür eki yerleştirin. Çanağı ters çeviri
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin