JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:55 dk. • July 8th, 2025
DNA'ya çapraz bağlanmış bir hedef proteine özgü antikorlarla kaplanmış önceden işlenmiş manyetik boncuklar içeren bir tüp ile başlayın.
DNA fragmanları içeren bir motor nöron lizatı ekleyin ve çalkalama ile inkübe edin.
DNA fragmanları, antikor kaplı boncuklarla etkileşime girerek boncuk-DNA kompleksleri oluşturur.
Sıvıyı kapaktan toplamak için santrifüjleyin ve boncuk-DNA komplekslerini çökeltmek için manyetik bir ayırıcı üzerine yerleştirin.
Bağlanmamış DNA parçaları içeren süpernatanı çıkarın.
Spesifik olarak bağlı olmayan DNA parçalarını çözündürmek için deterjan bazlı bir lizis tamponu ekleyin.
Santrifüjleyin ve manyetik ayırmayı gerçekleştirin, ardından süpernatanı çıkarın.
Spesifik olmayan etkileşimleri bozmak için yüksek tuz tamponu ile yıkayın. Santrifüj, manyetik ayırma işlemini gerçekleştirin ve süpernatanı çıkarın.
Kalan spesifik olmayan etkileşimleri gidermek için LiCl tamponu ile yıkayın. Santrifüj, manyetik ayırma işlemini gerçekleştirin ve süpernatanı çıkarın.
Son olarak, Tris-HCl tamponu, santrifüj ile yıkayın ve manyetik ayırma işlemini gerçekleştirin.
Süpernatanı çıkarın ve hedef protein-DNA komplekslerini içeren boncukları toplayın.
Kromatin immünopresipitasyonu
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin