JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:47 dk. • July 8th, 2025
Nöral indüksiyon ortamında insan serebral organoidlerini içeren çok kuyulu bir plaka alın.
Organoidler, kök hücreler, radyal glial hücreler, nöral progenitör hücreler veya NPC'ler ve gelişmekte olan beyni taklit eden rozet adı verilen radyal bir düzende düzenlenmiş nöronlar içerir.
Ortamı çıkarın ve organoidleri bir tamponla yıkayın.
Test kuyucuklarına bir tampon içinde süspanse edilmiş Zika virüsü ekleyin ve sadece kontrol kuyularına tamponlayın.
Kuluçkaya yatırın, virüsün NPC'lerdeki reseptörlerine bağlanmasına ve içselleştirilmesine izin verin.
İçselleştirilmemiş virüsleri çıkarmak için yıkayın, ardından taze nöral indüksiyon ortamı ekleyin ve inkübe edin.
İçselleştirilmiş virüsler, yeni viral parçacıklar oluşturmak için konak hücre mekanizmasını kullanır.
Viral çoğalma, apoptozu indükleyen ve organoid gelişimi için mevcut NPC'lerin sayısını azaltan bir hücresel stres tepkisini tetikler.
Zamanla, enfekte organoidler, Zika virüsü ile enfekte olmuş insanlarda anormal beyin gelişimini yansıtan küçültülmüş boyut ve bozulmuş morfoloji sergiler.
Earle'ün 1X Dengeli Tuz Çözeltisini, 1X PBS'yi ve Nöral İndüksiyon ortamını sıcak su banyosunda 37 santigrat dereceye getirin. Daha sonra, 1X
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin