JoVE Encyclopedia of Experiments
Sinirbilim
0 görüntüleme • 1:59 dk • July 8th, 2025
Fare birincil serebellar granül nöronlarının bir kültürünü ele alalım.
Hidrojen peroksit, reaktif bir oksijen türü veya ROS içeren ortam ekleyin ve kısa bir süre inkübe edin.
Hidrojen peroksit hücrelere yayılır ve oldukça reaktif serbest radikallere dönüştürülür.
Bu radikaller, hücre zarının bütünlüğünü tehlikeye atarak lipid peroksidasyonunu indükler.
Ek olarak, radikaller hücresel proteinlerde oksidatif modifikasyonlara neden olarak işlevlerini bozar.
Ayrıca, DNA kırılmalarına neden olarak genomik kararsızlığa yol açarlar.
Radikaller ayrıca mitokondri de dahil olmak üzere hücre içi organellerde oksidatif hasara neden olur.
Buna karşılık, hasarlı mitokondri, apoptotik proteaz aktive edici faktör-1'e bağlanan, apoptozom oluşumunu ve pro-kaspaz-9'un aktif kaspaz-9'a dönüşümünü tetikleyen sitokrom c salgılar.
Kaspaz 9, cellat kaspazlarını aktive eder, hücresel proteinleri daha da parçalar ve apoptotik nöronal ölüme yol açar.
Sinyal kaskadını durdurmak için ortamı yeni, hidrojen peroksit içermeyen ortamla değiştirin.
ROS'un neden olduğu hücre ölümü için, nöronları beş dakika boyunca 75 ila 100 mikromolar arasında hidrojen peroksit ile tedavi edin. Beş dakika sonra, paralel kültürlerden koşullandırılmış ortama geçirin.
Hidrojen peroksitin kararsızlığı nedeniyle, konsantrasyon 24 saat sonra %50 ila %70 hücre ölümüne neden olacak bir seviyeye optimize edilmelidir. Bu konsantrasyon genellikle 75 ila 100 mikromolar arasındadır.
Bu çalışma, oksidatif stresle tetiklenen hücre ölümü mekanizmalarına odaklanarak, hidrojen peroksidin fare primer serebellar granül nöronlar üzerindeki etkilerini incelemektedir. Araştırma, hücresel hasar ve apoptozda reaktif oksijen türlerinin rolünü vurgulamaktadır.
Fare serebellar granüler nöronlarında reaktif oksijen türleri (ROS) tarafından tetiklenen nöronal ölümün modellenmesi, nörodejenerasyonla ilgili oksidatif stres mekanizmalarının incelenmesi için kontrollü bir sistem sunar. Bu model, oksidatif hasarı hedefleyen terapötik programlar için erken aşama hedef doğrulamasına ve mekanistik risk azaltmaya olanak tanır. Bu yaklaşım, yolak modülasyonunda öngörülebilir güveni destekler ve nöroprotektif stratejiler için riskle uyumlu portföy kararlarına temel oluşturur.
Bu ROS kaynaklı nöronal ölüm modeli, erken keşiften öncü madde tanımlama sürecine kadar olan sürekliliğe uygundur ve nörodejenerasyon araştırmaları için hem hipotez testlerini hem de analiz gelişimini destekler.
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
Son güncelleme: 29 Ağustos 2026