JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:46 dk. • July 8th, 2025
Nöral krest hücrelerini içeren sabit fare embriyonik kraniyofasiyal dokularının kriyoseksiyonlarını alın.
Gömme ortamını çıkarmak ve zarları geçirgen hale getirerek hücre içi hedeflere erişim sağlamak için iyonik olmayan bir deterjan içeren tampondaki bölümleri yıkayın.
Spesifik olmayan bağlanma bölgelerini doyurmak için engelleme çözümü ekleyin.
Fazla engelleme solüsyonunu çıkarın. Daha sonra, transkripsiyon faktörleri ve proliferasyon belirteçleri gibi nükleer antijenleri hedefleyen birincil antikorlarla inkübe edin.
Bağlanmamış antikorları çıkarmak için tamponla yıkayın.
Antijene bağlı primer antikorlara bağlanmak için florofor konjuge sekonje sekonder antikorlarla inkübe edin.
Tampon kullanarak bağlanmamış antikorları çıkarın.
Floresan nükleer boya ile solmaya karşı dayanıklı bir ortam ekleyin ve bir lamel ile örtün.
Boya çekirdekleri lekeler ve solma önleyici ortam, görüntüleme sırasında floresan sinyallerini korur.
Nöral krest hücre proliferasyonunu ve sinyalleşme aktivitesini gösteren nükleer belirteç ekspresyonunu ve lokalizasyonunu değerlendirmek için bölümleri bir floresan mikroskobu altında görüntüleyin.
OCT'yi yıkamak ve bölümleri geçirgen hale getirmek için slaytları h
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin