Elektrik Stimülasyonu Kullanılarak Bir Sıçan Modelinde Akut Pons Enfarktüsünün İndüklenmesi

Anestezi uygulanmış bir fareyi stereotaksik bir üniteye sabitleyin.

Kürkü kafa derisinden çıkarın ve kesi bölgesini sterilize edin. Orta hatta bir kesi yapın ve kafatasını ortaya çıkarmak için cildi geri çekin.

Matkapla etkileşimi önlemek için bağ dokusunu çıkarın. Beyin sapında bulunan bir yapı olan ponsun koordinatlarını belirlemek için bregmayı bir referans noktası olarak tanımlayın.

Kafatasına bir delik açın.

Ponsa ulaşmak için delikten bir prob sokun.

Daha sonra, elektrotları bir elektrik stimülatörüne bağlayın, anodu beyin stimülasyonu için proba ve devreyi tamamlamak için katodu farenin kulağına takın.

Ponsa bir elektrik darbesi verin, lokalize doku hasarına veya enfarktüse neden olur.

Stimülasyondan sonra, stimülasyon etkisini stabilize etmek için probu kısa bir süre yerinde bırakın.

Ardından, probu yavaşça çıkarın ve cerrahi bölgeyi kemik çimentosu ile kapatın.

Kesiği dikin ve kurtarma ve nörolojik analiz için fareyi kafesine geri koyun.

Anesteziden hemen önce ısıtma yastığını 37 santigrat dereceye ısıtın ve kafatası matkabını stereotaksik çerçeve üzerindeki tutucuya takın. İlk anestezi uygulanan sıçanda pedal refleksine yanıt verilmediğini onaylayın ve sıçanı ısıtma yastığı üzerinde yüzüstü pozisyonda stereotaksik çerçeveye monte edin. Enjeksiyonun herhangi bir şekilde eğrilmesini önlemek için kafatasının yatay tutulmasına dikkat ederek başı sabitlemek için kulak çubuklarını kulak kanalının üzerine yerleştirin.

Hayvanın gözlerine merhem sürün ve tüyleri kafatasından çıkarmak için bir mikro tıraş makinesi kullanın. Kafatasının orta hattı boyunca bilateral lateral kanthus çizgisinden posterior bıngıldağın 0,5 santimetre arkasına kadar 3 santimetrelik bir çizgi çizmek için bir işaretleyici kullanın ve işaretli çizgi boyunca orta hat kesisi yapmak için bir neşter kullanın. Kanı çıkarmak için pamuklu çubuk kullanın ve kafatasını ortaya çıkarmak için deri kanadının her iki tarafına bir parça cerrahi bant yerleştirin.

Kafatasındaki herhangi bir bağ dokusunu nazikçe çıkarmak için %0.9 sodyum klorür ile ıslatılmış yeni bir çubuk kullanın ve bregmayı bulun. Bregma'nın merkez noktasını başlangıç noktası olarak belirtmek için ince uçlu bir işaretleyici kalem kullanın. Matkabı 6 milimetre ön-arka, 2 milimetre medial-lateral olacak şekilde yerleştirin. 1 milimetre çapında bir kraniyotoiyi dikkatlice gerçekleştirmek için matkabı kullanın. Ardından, matkabı, ucu kılıfın proksimal ucunun 2 milimetre üzerine yerleştirilmiş, yalıtımlı bir kılıfa sahip 22 gauge bir probla değiştirin.

Kılıfı beyne 7 milimetre yerleştirin ve sondanın üst kısmı beyin yüzeyinin 9 milimetre altına gelene kadar probu kılıf boyunca ilerletin. Elektrotları bir elektrik stimülatörüne bağlayın ve anodu proba bağlayın. Ardından, katodu farenin kulağına bağlayın. Ardından, elektrik stimülatörünü açın ve tek darbe genişliğini 4.050 milisaniyeye, voltajı 50 volta ve akımı 4 miliampere ayarlayın.

Cihazı beyinden çıkarmadan önce, stimülasyondan sonra probu beş dakika boyunca yerinde bırakın. Kraniotomiyi kemik çimentosu ile örtün ve yarayı kapatmak için 4-0 poliamid sütür filamentleri kullanmadan önce çimentonun kurumasını bekleyin. Üç veya dört dikişten sonra 2-1-1 standart cerrahi düğüm atın. Daha sonra, fareye intraperitoneal olarak 250 mikrolitre penisilin enjekte edin ve hayvanı kafesine geri döndürmeden önce tamamen uyanana kadar her 15 dakikada bir fareyi izleyin.