Agrege Amiloid-β'in Nöronal Büyüme Konisi Çöküşü Üzerine İn Vitro Değerlendirmesi

Bir ortamdaki bir fare embriyosundan nöronları içeren çok kuyulu bir kültür slaydı ile başlayın.

Nöronlar, büyüyen aksonlarının uçlarında büyüme konileri sergiler. Bu yapılar, hücre iskeletinin bileşenleri olan aktin filamentleri ve mikrotübüllerden oluşan filopodia adı verilen ince çıkıntıları ve lamellopodia adı verilen tabaka benzeri uzantıları içerir.

Test kuyucuklarını toplanmış amiloid-β veya Aβ proteini ile ve kontrol kuyularını bir araç çözeltisi ile muamele edin.

Test kuyularında, toplanmış Aβ, membran reseptörlerine bağlanarak, hücre iskeleti düzenleyici proteinleri fosforile eden aşağı akış sinyalizasyonunu başlatır.

Fosforile proteinler, aktin filamentlerini ve mikrotübülleri bozarak büyüme konisinin yapısal bütünlüğünü bozar ve çökmesine neden olur.

Hücresel yapıyı korumak için bir fiksatif ile inkübe edin, ardından hücreleri yıkayın ve görüntüleme için monte edin.

Bir mikroskop kullanarak, test ve kontrol kuyularındaki hücresel yapıları karşılaştırın.

Aβ ile tedavi edilen nöronlarda büyüme konisi çökmesinin artması, Aβ agregatlarının toksik etkisini gösterir.

Bu teste en az bir hafta önceden, ticari olarak elde edilen, tam uzunlukta A-beta-42'nin taze bir şişesini aça