JoVE Encyclopedia of Experiments
Sinirbilim
0 görüntüleme • 3:56 dk • July 8th, 2025
Bir proksimal sürücü bölümü, bir diyafram kama tertibatı ve basınç sensörleri ve bir numune tutucu ile distal tahrikli bir bölümden oluşan bir şok tüpü kurulumuyla başlayın.
Cihaz, kontrol ünitesi aracılığıyla basınçlı bir gaz tüpüne bağlanır.
Şok tüpü çıkışıyla hizalamak için numune tutucunun içinden bir körleme çubuğu sokun.
Basınç sensörlerini bir kayıt cihazına takın.
Şok tüpü kontrolünü kapalı tutun ve kontrol ünitesinde basınç oluşturmak için gaz tüpü çıkışını açın.
Kama tertibatına bir polyester levha diyaframı sabitleyin.
Deney ortamında beyin dilimleri içeren bir zar içeren bir torbayı numune tutucuya yerleştirin.
Şok tüpünün gaz kontrol düğmesini açın, gazın sürücü bölümüne girmesine izin verin ve hava basıncını artırın.
Bu, diyaframı yırtar ve bir şok dalgası oluşturan yüksek basıncı serbest bırakır.
Bu şok dalgası beyin dilimlerini hareket ettirir ve etkiler, travmatik doku hasarına neden olur.
Steril torba tutucu çerçevesini şok tüpünün distal flanşına cıvatalamak için bir kör çubuk kullanın ve merkezi deliğin şok tüpü çıkışıyla hizalandığından emin olun. Sensör 1, tahrik edilen bölümün orta kısmında bir basınç dönüştürücü bulunur ve sensör 2, şok tüpünün distal flanşındadır.
Bu basınç dönüştürücülerini bir akım kaynağı güç ünitesi aracılığıyla bir osiloskopa bağlayın ve osiloskopu açın. Şok tüpü solenoid valfinin ve akış kontrolünün kapalı olduğundan emin olun, ardından harici basınçlı hava hattını açın ve solenoid valfi 2,5 bar'a kadar şarj edin. Basınçlı hava silindiri emniyet valfini açın ve basıncı yaklaşık 5 bar'a çıkarmak için basınç regülatörünü yavaşça açın.
Ardından, 23 mikron kalınlığındaki polyester levhaları 10 x 10 santimetre kareler halinde keserek diyaframları hazırlayın. Otoklav bandından kulpları hazırlayın ve her diyaframın üstüne ve altına yapıştırın. Bir diyaframı gediklere yerleştirin ve ortalandıklarından emin olun.
Ardından, dört M24 cıvata ve somun kullanarak diyaframı sıkıştırın. Diyaframların kırışıksız olduğundan emin olurken çapraz simetrik bir şekilde sırayla sabitleyin. Steril bir torbayı, organotipik hipokampal dilimlerle doku kültürü ekinin yüzeyinin şok tüpü çıkışına baktığından ve doku kültürü ekinin steril torbanın içinde ortalandığından emin olarak, tutucu çerçeve üzerinde dikey konumda sıkıştırın.
Çift diyafram konfigürasyonu için, patlama basıncı, sürücü ile çift kama odası arasındaki gaz basıncı farkına bağlıdır. Bu nedenle, diyaframların kontrollü bir şekilde patlaması için, hedef basınçlara ulaşıldığında çift kama emniyet valfi manuel olarak açılır.
Henüz takılmamışsa, kulak koruyucuları ve koruyucu gözlükleri takın. Solenoid valfi kapatın. Şok dalgası verilerini almak için mevcut kaynak güç ünitesini açın.
Hem sürücü hacmi bölümü hem de çift diyafram konfigürasyonu için şok tüpünün çift makat bölümü için tek diyafram konfigürasyonu için şok tüpünün sürücü hacim bölümüne yavaşça basınç uygulamak için şok tüpü kontrol panelindeki akış kontrol düğmesini manipüle edin. Diyafram yırtılır yırtılmaz, akış düğmesini kullanarak basınçlı hava akışını hızlı bir şekilde kapatın ve solenoid valfi açın.
Şok dalgası parametrelerinin ideal kombinasyonu, doku hasarına neden olmak için yeterli olmalı, ancak doku kültürü ekine veya steril torba distorsiyonuna veya yırtılmasına neden olacak kadar yüksek olmamalıdır.