Merkezi Sinir Sistemi Enfeksiyonu Olan Bir Murin Modelinin Oluşturulması

Merkezi sinir sistemi (CNS) enfeksiyonu için hedeflenen virüsleri içeren farklı hacimlerde ortamla doldurulmuş iki şırınga ile başlayın.

Fare yavrusunu yüzüstü pozisyonda tutun. Kafayı dezenfekte edin ve daha küçük hacimli virüs çözeltisini lambda bölgesinden intraserebral olarak enjekte edin.

Bu, virüslerin kan-beyin bariyerini atlamasına ve doğrudan beyin dokusuna ulaşmasına izin verir.

Ardından, fare yavrusunu sırtüstü pozisyonda tutun. Dezenfekte edin ve virüs çözeltisinin daha büyük hacmini karın içine enjekte edin.

Bu, virüsün kan damarları yoluyla sistemik yayılmasını kolaylaştırır ve CNS'nin diğer kısımlarını enfekte eder.

Enjekte edilen virüsler nöronal hücrelere girer ve çoğalmak için konakçı makineleri kullanır ve hücre ölümüne yol açar.

Virüsler ayrıca bağışıklık sistemini tetikleyerek CNS iltihabına neden olur ve bir CNS enfeksiyon modeli oluşturur.

Enfeksiyon prosedürüne başlamadan önce, adapte edilmemiş dang virüsü 2 stoğunu 40 mikrolitre RPMI 1640 orta konsantrasyonu başına 1 kez 10 ila beşinci plak oluşturan birimlere seyreltin. Daha sonra, 10 mikrolitre seyreltilmiş virüs içeren 30 gauge iğne ile donatılmış 10.3 mililitre şırınga ve hayvan başına 30 mikrolitre virüs içeren 30 gauge iğne ile donatılmış 10.3 mililitre şırınga yükleyin.

Virüsün intraserebral iletimi için, yedi günlük emziren bir Kanser Araştırma Enstitüsü Faresini yüzüstü pozisyonda nazikçe dizginlemek için başparmak ve işaret parmağı arasındaki oracle'a bastırın ve 10 mikrolitre hacmindeki seyreltilmiş virüsü sagital ve lambdoid sütürün kesişme noktasındaki lambda alanına enjekte edin. İntraserebral enjeksiyondan sonra, fareyi sırtüstü pozisyonda tutmak için başparmağınızı ve işaret parmağınızı kullanın ve nazikçe intraperitoneal olarak, 30 mikrolitre hacmindeki seyreltilmiş virüsü Murine karnına enjekte edin.