JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:00 dk. • July 8th, 2025
Epidermisin en derin tabakası olan stratum basaë'yi açığa çıkaran ayak tabanında mikro yaralar bulunan anestezi uygulanmış bir fare alın.
Bu tabaka, omuriliğin yakınındaki dorsal kök gangliyonlarına veya DRG'ye bağlı periferik sinir lifleri içerir.
Sinir sistemini hedef alan bir psödokuz virüsü aşısını yaraya uygulayın ve adsorpsiyonu arttırmak için bir iğne mili ile ovalayın.
Virüs, hücre yüzeyi reseptörlerine bağlanır ve bu da virüsün girmesine ve replikasyona başlamasına izin verir.
Viral parçacıklar yakındaki hücrelere yayılır ve periferik sinirlere girer.
Virüs daha sonra DRG'ye gider ve omurilikten beyne yayılarak nöronları enfekte eder.
Enfekte nöronlar, makrofajları ve nötrofilleri çekmek için sitokinleri ve kemokinleri salgılayan yerleşik mikrogliaları aktive ederek DAMP'leri serbest bırakır.
Bu bağışıklık hücreleri, nöronlara zarar veren ve nöroinflamasyona yol açan reaktif oksijen türlerini ve proteolitik enzimleri serbest bırakır.
Topikal olarak 20 mikrolitre uygun virüs aşısı titresini aşındırılmış ayak pedine uygulayın. Ortam ile sahte aşılamaları yalnızca kontrol hayvanlarının aşınmış ayak tabanlarında paralel olarak gerçekleştirin. Her uygulamadan sonra, virüsün emilimini 30 dakika boyunca her 10 dakikada bir kolaylaştırmak için ayak tabanını bir iğnenin şaftı ile 10 kez nazikçe ovalayın. Aşınmış ayak pedi kuruduğunda, hayvanları klinik takip ve numune alma için ayrı kafeslere yerleştirmeden önce farelerin sternal yaslanma dönemine kadar izleme ile iyileşmesine izin verin.