Transgenik Nematodlarda Prion Benzeri Proteinlerin Hücre Arası Yayılımını İzlemek için Hızlandırılmış Görüntüleme

Aynı gelişim aşamasında tutulan transgenik nematodları alın.

Bu nematodların vücut duvarı kas hücreleri, kırmızı bir floresan proteini ile etiketlenen ve asidik veziküller içinde lokalize olan prion benzeri proteinleri eksprese eder.

Prion benzeri proteinler yanlış katlanır, nörodejeneratif hastalıklarla ilişkili proteinleri toplar.

Daha sonra, nematodları polimerik nanopartiküller ve anestezik bir çözelti içeren bir agaroz ped üzerine aktarın.

Nanopartiküllerin ve anestezik çözeltinin birleşik etkileri, nematodları agaroz ped üzerinde hareketsiz hale getirir.

Agaroz pedinin üzerine bir lamel yerleştirin ve kapatın.

Şimdi, agaroz ped düzeneğini nematodlarla birlikte konfokal bir mikroskop altında konumlandırın ve uygun görüntüleme parametrelerini ayarlayın.

Prion benzeri proteinlerin vücut duvarı kas hücreleri içinde ve arasında veziküler taşınmasını izlemek için nematodlar içindeki floresan etiketli proteinlerin hızlandırılmış görüntülerini elde edin.

Senkronize C. elegans kontrol ve prion alanı transgenik hatları ve ekteki metin protokolüne göre% 10 agaroz pedleri hazırladıktan sonra, 3 mikrolitre 100 nanogram polistiren boncuk ve 3 mikrolitre 4 milimolar levamisol pipetleyin aga