JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:31 dk. • July 8th, 2025
Zebra balığı beyninde nöronlar, metabolizmayı düzenleyen oreksin ve kanabinoid reseptörlerini eksprese eder.
Diyete bağlı obez veya DIO, zebra balığında, bu reseptörler giderek daha fazla heteromerler oluşturmak üzere birlikte lokalize olur, aşağı akış sinyalizasyonunu değiştirir ve metabolik düzenlemeyi etkiler.
Hem kontrolden hem de DIO zebra balığından beyin dokusunun kriyokesitlerini alın. Gömme ortamını çıkarmak için bölümleri tamponla yıkayın.
Hücresel zarları geçirgen hale getirmek ve spesifik olmayan bağlanma bölgelerini maskelemek için geçirgenliği engelleyen bir tampon ile muamele edin. Fazla tamponu çıkarmak için yıkayın.
Reseptörleri hedef alan bir birincil antikor kokteyli ile inkübe edin. Bağlanmamış antikorları çıkarmak için yıkayın.
Birincil antikorlara bağlanan farklı florofor etiketli ikincil antikorlarla inkübe edin. Bağlanmamış antikorları çıkarmak için yıkayın.
Çekirdeği etiketlemek için floresan DNA bağlayıcı bir boya ekleyin. Ardından, bir montaj ortamı uygulayın ve bölümleri bir lamel ile kapatın.
Konfokal bir mikroskop kullanarak antikor floresansını tespit edin. Kontrollere kıyasla DIO zebra balığındaki antikorların artan ko-lokalizasyonu, daha yüksek rese
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin