İnsan Rektal Aspirasyon Biyopsi Kesitlerinde S-100 Proteininin İmmünohistokimyasal Boyanması

0 görüntüleme3:02 dk • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Maruz kalan protein antijenleri ve inaktive edilmiş endojen peroksidazlar ile sabit insan rektal aspirasyon biyopsi kesitleri alın.

Spesifik olmayan antikor bağlanmasını önlemek için bir engelleme solüsyonu ekleyin.

Bloke edici solüsyonu, Hirschsprung hastalığının bir belirteci olan hedef glial hücre proteini S-100'e bağlanan birincil antikorlarla değiştirin.

Bağlanmamış antikorları çıkarın ve sinyali yükseltmek için peroksidaz polimerleri ile inkübe edin.

Fazla polimeri çıkarmak için yıkayın. Enzim polimerlerine ve birincil antikorlara bağlanan ikincil antikorlar ekleyin.

Bağlanmamış antikorları çıkarın ve kromojenik bir substrat ekleyin.

Peroksidazlar substrat ile reaksiyona girerek renkli bir çökelti oluşturur.

Fazla çökeltiyi gidermek için durulayın.

Çekirdekleri boyamak için bir boya ekleyin.

Fazla boyayı çıkarmak için bir asit-etanol çözeltisi ile yıkayın.

Daha sonra, artan konsantrasyonlarda etanol ve ardından ksilen kullanarak bölümleri kurutun.

Son olarak, hedef proteinin varlığını gösteren lekelenmeyi görselleştirmek için monte edin ve mikroskop altında gözlemleyin.

Fazla sığır serum albüminini atın ve hücreleri gece boyunca 4 santigrat derecede ilgilenilen birincil antikorun 50 mikrolitresi ile etiketleyin. Ertesi sabah, slaytları PBS'de üç dakikalık üç yıkama ile durulayın ve her slayta 50 mikrolitre polimer arttırıcı ekleyin. 37 santigrat derecede 20 dakika sonra, slaytları PBS'de üç kez yıkayın ve her doku bölümüne 50 mikrolitre ikincil antikor B ekleyin.

37 santigrat derecede 30 dakika sonra, bölümleri PBS'de beş dakikalık üç yıkama ile durulayın ve her slayta bir damla taze hazırlanmış DAB çalışma solüsyonu ekleyin. Işık mikroskobu ile uygun kahverengi lekelenme seviyesi tespit edildiğinde, slaytları PBS'de beş dakika durulayın ve çekirdekleri bir dakika boyunca bir damla hematoksilen ile boyayın.

Fazla lekeyi yaklaşık 30 ila 40 saniye boyunca bir damla su altında çıkarın, ardından taze PBS'de 25 ila 30 saniyelik bir yıkama yapın. Dokuları 10 saniye boyunca% 1 hidroklorik asit etanol içinde ayırt edin, ardından bir dakikalık bir PBS yıkaması yapın.

Slaytları, hidrasyon sırasının tersine beş dakikalık daldırmalarla kurutun ve slaytları beş dakikalık iki ksilen değişimine maruz bırakın. Ardından, ultraclean montaj kullanarak lamel monte edin ve slaytların ışık mikroskobu üzerinde görselleştirilmeden önce kurumasını bekleyin.

09:32

Alfa-sinüklein fibrillerinin Çevresel Aşılama sonrası Tranjenik Farelerde Nöroinflamasyondan Biyoparlaklık Görüntüleme

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:44

ImageJ kullanarak doku hazırlanan immünhistokimya Photomicrographs üzerinden Microglia morfoloji miktarının

İlgili videolar

0 Görüntüler

06:38

İmmünohistokimya ile Anormal Prion Proteininin Saptanması

İlgili videolar

0 Görüntüler

11:39

Doğal Müsin Dağıtım Eğitim için sabitlenmemiş, Dondurulmuş Dokular kullanma

İlgili videolar

0 Görüntüler

04:52

İmmünohistokimyasal Boyama: İnce Doku Kesitlerinden Mekansal Bilgi Elde Etmeye Yönelik Bir Yöntem

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:38

İnce Barsak Nöroendokrin Tümör Sferoidlerinin İmmünofloresan Kullanılarak Karakterizasyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

03:36

Beyin Tümörü Nörosfer Kesitlerinde Biyobelirteçlerin İmmünohistokimyasal Boyanması

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:40

Çoklanmış Immuno-histokimyasal boyanması ve Multispektral Görüntüleme kullanma Protein Ekspresyonu ve Co-lokalizasyon Kantifikasyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

05:45

Calretinin için Immünostasyon rektal emiş biyopsisi ile Hirschsprung hastalığının tanısı, S100 protein ve protein gen ürün 9,5

İlgili videolar

0 Görüntüler

12:55

İnsan S100A12 ve Bağışıklık Hücre Stimülasyonu için Iyon kaynaklı Oligomerlerin Saflaştırılması

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 22 Ağustos 2026