Otolog Kan Enjeksiyonu ile İndüklenen Subaraknoid Kanama Sıçan Modelinin Kurulması

Kafatası açıkta ve kafa içi basıncı ölçmek için implante edilmiş bir prob ile anestezi uygulanmış bir sıçan alın.

Kafatası üzerinde bir referans noktası kullanarak hedef bölgeyi işaretleyin ve bir delik açın.

Kemik parçalarını çıkarın ve deliği kemik mumu ile doldurun.

Başka bir delik açın. Bir kan damarı bulun ve serebral kan akışını ölçmek için bir prob sabitleyin.

Bir iğne alın ve kafatası hissedilene kadar beyne sokun.

Büyük kan damarlarının bulunduğu optik kiazmanın önüne yerleştirilmesini sağlamak için hafifçe geri çekin.

İğne haznesini farenin kuyruğundan alınan taze kanla doldurun ve kan içeren şırıngayı bağlayın.

Kanı, dış ve iç beyin zarları arasındaki sıvı dolu subaraknoid boşluğa enjekte edin, bu da kafa içi basıncını artırarak kan damarı daralmasına neden olur.

Bu, serebral kan akışının azalmasına yol açarak bir subaraknoid kanama modeli oluşturur.

Lazer Doppler probunu yerleştirmek için, gözlerin hemen önünden başlayarak orta hatta kaudal olarak 15 milimetrelik bir kesi yapın. Bağ dokusunu ve kasları forseps ile çıkardıktan sonra, bregma ve koronal sütürleri tanımlamak için steril bir pamuklu çubuğun ucunu rejim olarak kullanın.

Silahlı ekartörü yerleştirdikten sonra, stereotaksik çerçeveye tam olarak bregma üzerine 25 gauge bir omurga iğnesi yerleştirin ve konumu not edin. Sonra, iğneyi bregmadan çıkarın. Çerçeveyi 6,5 milimetre öne doğru hareket ettirin, ardından delme tarafını işaretlemek için orta çizgideki iğneyi değiştirin.

Dura mater kemiğin altında tanımlanana kadar delin. Düz forseps kullanarak, kemik parçalarını nazikçe çıkarın, ardından boşluğu kemik mumu ile doldurun. Daha sonra, bregmanın sağında 3 ila 4 milimetre lateral ve lazer Doppler için koronal sütürün hemen önünde, dura mater'e nüfuz etmemeye dikkat ederek başka bir delik açın.

Lazer Doppler'in kan akışını ölçebildiği damarları arayın. Lazer Doppler'i yerleştirin ve değerleri kontrol edin. Minimum 100 akı birimi değeri gereklidir. Mikroskobu çıkardıktan sonra değerler kabul edilebilir kalırsa, probu sabitlemek için 1 damla yapıştırıcı ekleyin. Değerin 80 akı biriminin üzerinde olup olmadığını doğrulamak için yeniden kontrol edin.

Subaraknoid kanamayı indüklemek için, kafatasının tabanı nedeniyle direnç hissedilene kadar iğneyi hemisferler arasındaki orta hatta kafatasından nazikçe sokun. Optik kiazmanın hemen önüne doğru yerleştirmeyi sağlamak için iğneyi 1 milimetre geri çekin. Kanı enjekte ederken en homojen sonucu elde etmek için, iğneyi iğne ucu sağa bakacak şekilde saat yönünde 90 derece çevirin. Ardından stilettoyu çıkarın.

15 dakikalık bir dengelemeden sonra, 80 ila 100 milimetre cıva aralığında ortalama bir arteriyel kan basıncı elde etmek için anestezi seviyesini ayarlayın. Ardından, pH, kısmi karbondioksit basıncı ve kısmi oksijen basıncının fizyolojik parametreler dahilinde olduğunu doğrulamak için bir kan gazı analizi yapın.

Daha sonra, künt 23 gauge iğneli 1 mililitrelik bir şırınga kullanarak, kuyruk kateterinden 500 mikrolitre kan çekin. Hava enjeksiyonunu önlemek için, spinal iğne odasının ölü alanını kanla doldurun. Şırıngadaki kanın hacmini 300 mikrolitreye ayarladıktan sonra, şırıngayı omurilik iğnesine bağlayın. Ardından, şırınganın etrafını sıkıca kavrayarak, ortalama arteriyel basıncı aşmak için kanı manuel olarak enjekte edin. İntraserebral basınçta dik bir artış ve serebral kan akışında eşzamanlı dik bir düşüş gözlemleyin.