JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:14 dk. • July 8th, 2025
Fare beyin sapında iki taraflı olarak bulunan locus coeruleus bölgeleri, norepinefrin üreten nöronlar içerir ve beynin çeşitli bölgelerini düzenler.
Bu locus coeruleus bölgelerini tespit etmek için, sabit, dondurularak saklanmış fare beyin sapı bölümlerini taşıyan bir cam slaytla başlayın.
Sabitleyici izleri gidermek için slaytı bir tamponla yıkayın.
Deterjan içeren bir tampon ekleyin ve zarları geçirgen hale getirmek için inkübe edin, ardından yıkayın.
Dopamini bir nörotransmitter olan norepinefrine dönüştüren dopamin β-hidroksilaz enzimine özgü birincil antikorları tanıtın.
Antikorların dopamin β-hidroksilaz ile etkileşime girmesine izin vermek için inkübe edin.
Bağlanmamış antikorları çıkarmak için yıkayın.
Ardından, yeşil floroforla bağlanmış ikincil antikorları ekleyin ve karanlıkta inkübe edin.
İkincil antikorlar, birincil antikorlara bağlanır ve daha sonra yıkanır.
Beyin bölümlerine montaj ortamı ekleyin, ardından örtün ve kurulayın.
Slaytları floresan mikroskobu altında gözlemleyin.
Beyin bölümlerinde etiketli norepinefrin üreten nöronları temsil eden yeşil floresan, locus coeruleus bölgelerinin varlığını gösterir.
İlk gün, 24 oyuklu plakadaki beyin dilimlerini PBS'de her b
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin