JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:29 dk. • July 8th, 2025
Beynine bir kılavuz kanül implante edilmiş anestezi uygulanmış bir fareyi ele alalım.
Kanülün içindeki kukla bir prob, doku kalıntılarının girişini önler.
Farenin boynuna bir tasma yerleştirin.
Kukla probunu, yüksek moleküler ağırlığa sahip moleküllerin akışına izin veren özel bir yarı geçirgen zar içeren bir mikrodiyaliz probu ile değiştirin.
Prob, fizyolojik bir tamponun akışını düzenlemek için giriş ve çıkış portları aracılığıyla pompalara bağlanır.
Tasmayı kullanarak fareyi bir kafesin içine bağlayın, iyileşmesine izin verin ve akışı başlatın.
Tampon, beyin dokusuna girişten girer ve hücresel iletişimde yer alan proteinleri içeren hücre dışı boşlukta interstisyel sıvı veya İDF ile karışır.
Bileşenler zar boyunca yayılır ve çıkıştan fraksiyonlar halinde toplanır.
Hücre dışı proteinler içeren toplanan İDF analize hazırdır.
Tasmayı anestezi uygulanmış kılavuz kanül implante edilmiş hayvanın boynuna yerleştirin ve başlık somununu ve kukla probu çıkarın. Mikrodiyaliz probunu kılavuz kanülden yavaşça geçirin ve başlık somununu sıkın.
Ardından, fareyi serbest hareket eden bir sisteme bağlı bir kafese yerleştirin ve fareyi tasma ile bağlayın. En az bir saat sonra, silindir pompasını ve şırınga pompasını sırayla durdurun, şırınga pompası silindir pompasından %20 daha hızlı ayarlanmış olarak pompaları yeniden başlatın ve çıkış borusunun serbest ucunu soğutmalı bir fraksiyona yerleştirin beyin ISF'sini toplamak için toplayıcı. Uygun deneysel hacim elde edildiğinde, probu çıkarın ve fare kurtarmayı az önce gösterildiği gibi gerçekleştirin.