Mikroglia Glioblastoma Ko-Kültürü Kullanılarak Matris Tabanlı Tümör İnvazyonu Modeli
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:23 dk. • July 8th, 2025
Her biri farklı bir floresan boya ile boyanmış glioblastoma ve mikroglial hücrelerin soğuk bir süspansiyonunu soğuk bir polimer matris çözeltisine ekleyerek başlayın.
Soğuk durum, matrisin erken polimerizasyonunu önler.
Daha sonra, karışımı bir kültür plakası içindeki gözenekli bir oda ekine aktarın.
Matris polimerizasyonuna izin vermek için inkübe edin ve hücreleri gömen bir jel oluşturun.
Eke serumsuz ortam ve aşağıdaki kuyucuğa serum içeren büyüme ortamı ekleyin, ardından inkübe edin.
Serumdaki kimyasal faktörler, serum açısından zengin ortama doğru hücre göçünü teşvik eder.
Ek olarak, mikroglia, glioblastoma hücreleri ile etkileşime giren sinyal molekülleri salgılar.
Bu, glioblastoma hücresinin gözenekli ekin alt tarafına göçünü arttırır ve bir tümörden çevre dokuya göçlerine benzer.
Hücreleri odanın üstünden çıkarın.
Şimdi, kalan hücreleri bir fiksatif ile sabitleyin ve tamponla yıkayın. Hücrelerin belirgin floresansı, hücre göçünün izlenmesine yardımcı olur.
Matris karışımını gece boyunca dört santigrat derecede çözün. Daha sonra, buz üzerinde uygun ortamda 10 mg / ml'lik bir matris konsantrasyonu hazırlayın. Ardından, daha önce gösterildiği gibi matriste süspansiyon için eti
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin