Fetal Nöral Kök Hücrelerin Zika Virüsü Enfeksiyonu

İstenilen enfeksiyon çokluğuna, virüs parçacıklarının hücrelere oranına sahip patojenik bir virüs olan Zika virüsünün bir süspansiyonunu alın.

Virüs süspansiyonunu insan fetal beyin nöral kök hücreleri ile karıştırın.

Karışımı inkübe edin, virüsün hücreler üzerindeki reseptörlere bağlanmasına izin vererek viral endositozu kolaylaştırın.

Daha sonra, karışımı santrifüjleyin ve içselleştirilmemiş viral partiküller içeren süpernatanı atın.

Virüs ile enfekte olmuş hücreleri ortamda yeniden süspanse edin ve bunları hücre yapışmasına izin veren hücre dışı matris protein kaplı çok oyuklu bir plakaya tohumlayın.

Plakayı inkübe edin.

İçselleştirilmiş Zika virüsü, yeni viral parçacıklar üretmek için konakçı hücre makinesini kullanır.

Viral replikasyon, hücre morfolojisini önemli ölçüde değiştirerek hücresel hasara neden olur ve enfeksiyonun komşu hücrelere yayılmasını kolaylaştırır.

Zika virüsü ile enfekte olmuş hücreler daha fazla analiz için kullanılabilir.

ZIKV stoğundaki peleti, 1 ile 10 arasında bir Enfeksiyon Çokluğu veya MOI'de yeniden askıya alın. ZIKV çözeltisinin hacmi 0,5 mililitreyi geçmemelidir. Numuneleri 37 santigrat derecede bir saat inkübe edin. Daha sonra, tüpü iki ila üç ke