JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:58 dk. • July 8th, 2025
Kolin asetiltransferaz enzimini ifade eden sinir lifleri açısından zengin, Meynert'in çekirdek bazalini içeren sabit bir fare beyni bölümünü ele alalım.
Kesit, endojen peroksidazı devre dışı bırakmak için ön işleme tabi tutulur.
Hücresel zarları geçirgen hale getirmek için bir deterjan ekleyin, ardından spesifik olmayan antikor bağlanmasını önlemek için bir bloke edici çözelti ekleyin.
Çözeltiyi, kolin asetiltransferaza bağlanan birincil antikorlarla değiştirin.
Bağlanmamış antikorları çıkarmak için tamponla yıkayın. Primer antikorlara bağlanan biotin etiketli ikincil antikorlarla inkübe edin.
Bağlanmamış antikorları çıkarın ve ikincil antikorlara bağlanan avidin-biotin-peroksidaz kompleksleri ekleyin.
Fazla kompleksleri çıkarmak için yıkayın.
Peroksidaz ile reaksiyona giren ve renkli bir çökelti oluşturan kromojenik bir substrat ekleyin.
Fazla çökeltiyi gidermek için damıtılmış su ile durulayın.
Bölümü jelatinleştirilmiş bir slayt üzerine aktarın.
Daha sonra, artan etanol konsantrasyonları ve ardından ksilen kullanarak bölümü kurutun.
Kesiti monte edin ve lekeli sinir liflerini görselleştirmek için mikroskop altında gözlemleyin.
Doku bölümlerinin immünohistokimyasal olarak işaretl
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin