JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:24 dk. • July 8th, 2025
Motor kontrolü için gerekli olan paralel lifler, tırmanma lifleri ve Purkinje hücreleri içeren bir fare serebellar beyin dilimi ile başlayın.
Dilim, bir Purkinje hücresine bağlı bir kayıt elektrotu ve paralel ve tırmanan liflerin yakınında uyarıcı elektrotlar ile yapay bir beyin omurilik sıvısına daldırılır.
Paralel liflere elektriksel uyaranlar uygulayın ve Purkinje hücresinin yakınında uyarıcı bir nörotransmitter olan glutamatın salınmasını sağlayın.
Nörotransmiterler glutamat reseptörlerine bağlanarak Purkinje hücrelerini aktive eden ve bir elektrik sinyali üreten iyon akışına yol açar.
Purkinje hücrelerinden optimum bir yanıt için uyaran yoğunluğunu ayarlayın.
Ardından, tırmanan ve paralel liflere tekrarlayan stimülasyonlar verin.
Tırmanan lif uyaranları, Purkinje hücresi üzerindeki voltaj kapılı kalsiyum kanallarını aktive ederek önemli bir kalsiyum akışına neden olur.
Bu, glutamat reseptörlerinin içselleştirilmesini tetikleyerek hücrenin glutamata duyarlılığını azaltır.
Bu, paralel lif stimülasyonuna azalmış bir yanıt ile karakterize uzun süreli depresyona neden olur.
Uzun süreli depresyon indüksiyonu için, moleküler tabakayı 0.1 milisaniyelik bir darbeyle uyarın ve paralel fiber uyarıcı postsinaptik akımları tanımlamak için bir çift darbe uyarıcısı uygulayın. Eşleştirilmiş bir nabız kolaylaştırması ve stimülasyon yoğunluğundaki artışa bağlı olarak genlikte kademeli bir artış gözlenmelidir. Test yanıtını kaydetmek için, tek bir 0.1 hertz darbesi uygulayın ve uyaranın yoğunluğunu, uyarılan genlik yaklaşık 200 pikoamper olacak şekilde ayarlayın.
Purkinje hücre tabakasının altındaki tırmanma liflerini uyarın ve tırmanma lifi aktivasyonu tarafından ortaya çıkan paralel lif uyarıcı postsinaptik akımları tanımlamak için bir çift darbe uyarıcısı uygulayın. Eşleştirilmiş bir nabız depresyonu, stimülasyon yoğunluğundaki artışla ilişkili olarak ya hep ya hiç şeklinde gözlenmelidir.