Kan-Beyin Bariyerinin Patojen Geçişini ve Beyin Hücresi Enfeksiyonunu İncelemek için İn Vitro Bir Model
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:41 dk. • July 8th, 2025
Gözenekli bir zarla ayrılmış iki bölmeden oluşan bir in vitro kan-beyin bariyeri veya BBB modelini ele alalım.
Üst veya luminal bölme mikrovasküler endotel hücreleri içerir. Bu hücreler, hücrelerin ve moleküllerin geçişini sınırlayan kan-beyin bariyeri endotelyumunu taklit ederek sıkı bağlantıları ifade eder.
Alt veya abluminal bölme, beyin parankimini temsil eden nöronlar, astrositler ve mikroglia içerir.
Kan yoluyla bulaşan bir enfeksiyonu simüle etmek ve inkübe etmek için luminal bölmeye bir nörotropik virüs yerleştirin.
Virüs, endotel hücreleri tarafından endositoza uğrar, veziküller içinde hücre içi trafiğe uğrar ve abluminal tarafta salınır.
Kuluçka sonrası, üst hazneyi çıkarın. Viral miktarı değerlendirmek için ortamı abluminal taraftan örnekleyin ve endotel tabakasının başarılı bir şekilde geçildiğini onaylayın.
Taze ortam ekleyin ve tekrar inkübe edin.
Virüs, nöral hücrelere endositoz yoluyla girer, çoğalır ve viral dölleri serbest bırakır.
Viral nöroinvazyon ve replikasyonu doğrulamak için artan hücre dışı viral yükü ölçün.
Bir BBB mini beyin cihazı kurduktan sonra, gösterildiği gibi, luminal bölmenin üstüne çok dikkatli bir şekilde 50 mikrolitre% 2 FBS endotel hücre orta
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin