JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:13 dk. • July 8th, 2025
Koyu kırmızı floresan etiketli donör mitokondri içeren bir tüp ile başlayın.
Mitokondriyi dağıtmak için soğuk bir proliferasyon ortamı ekleyin.
Mitokondriyal çözeltiyi, modifiye edilmiş glioblastoma kök hücreleri veya GSC'leri içeren kuyunun dibine yakın bir yere dağıtın.
Bu modifiye beyin kanseri hücreleri mavi floresan boya ile etiketlenir ve kırmızı floresan etiketli endojen mitokondri içerir.
Süspansiyon, kuyunun tüm yüzeyini kaplar ve mitokondriyi eşit olarak dağıtır.
Mitokondriyi etkileşimleri için hücrelere yaklaştırmak için kültür plakasını santrifüjleyin.
Şimdi, kültür plakasını inkübe edin.
Hücre zarı, donör mitokondri de dahil olmak üzere hücre dışı materyali yutan büyük veziküller oluşturur.
Hücreler daha sonra bu vezikülleri içselleştirir, donör mitokondriyi sitoplazmalarına bırakır ve potansiyel olarak GSC metabolizmasını ve fonksiyonlarını değiştirir.
Hücreleri konfokal mikroskop altında gözlemleyin.
Görüntü analizinden sonra, kırmızı endojen mitokondri ile birlikte yeşil donör mitokondri içeren mavi hücrelerin varlığı, başarılı mitokondriyal transferi doğrular.
İzole MSC mitokondrisini GSC'lere aktarmak için, mitokondriyal pelete 200 mikrolitre önceden soğutulmuş GS
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin