Yukarı Düzenlenmiş Glikoz Metabolizması ile Drosophila Larvalarının Motor Nöronlarında Glikoz Alımının Değerlendirilmesi
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:11 dk. • July 8th, 2025
Kontrolü ve mutant Drosophila larvalarını glikoz içermeyen bir tampon içeren ayrı tabaklara yerleştirin.
Merkezi sinir sistemini veya CNS'yi açığa çıkaran iç organları çıkarmak için larvaları inceleyin.
CNS, motor nöronları barındıran bir ventral sinir kordonu içerir. Mutant larvalarda, bu nöronlar yukarı regüle edilmiş glikoz metabolizması sergiler.
Her iki gruptaki motor nöronlar, donör ve alıcı floroforlar içeren hücre içi glukoz sensörlerini eksprese eder.
Larvaları konfokal bir mikroskop altında konumlandırın. Uyarılma üzerine, donör florofor floresan yayar.
Bu floresanı kullanarak motor nöronları bulun.
Tamponu glikoz takviyeli bir çözelti ile değiştirin.
Glikoz nöronlara girer, sensörlere bağlanır ve iki floroforu yakınlaştıran konformasyonel bir değişikliği tetikler.
Uyarılma üzerine, alıcı, floresan rezonans enerji transferi veya FRET olarak adlandırılan donör tarafından yayılan enerjiyi emer ve floresan yayar.
FRET sinyali, glikoz alımı ile ilişkilidir. Mutant larvalarda kontrole kıyasla daha yüksek bir alıcı sinyal yoğunluğu, yukarı regüle edilmiş glikoz metabolizmasını gösterir.
Diseksiyonlara başlamadan önce görüntüleme mikroskobunu ve lazerleri açın. Ardından, dolaşan
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin