JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:46 dk. • July 8th, 2025
Bir floresan proteini ifade eden seyrek bir astrosit popülasyonu içeren sabit bir fare beyin dokusu bölümünü ele alalım.
Hücrelere nüfuz etmek için serbest yüzen bölüme deterjan içeren bir tampon uygulayın.
Spesifik olmayan antikor bağlanmasını önlemek için bölümü bir bloke edici tamponda inkübe edin.
Bölümü birincil antikorlarla tedavi edin ve antikorların astrositlerdeki floresan proteinlere bağlanmasına izin vermek için inkübe edin.
Tampon kullanarak fazla primer antikorları yıkayın.
Daha sonra, bölümü, birincil antikorlara bağlanan florofor etiketli ikincil antikorlarla inkübe edin.
Bağlanmamış ikincil antikorları bir tampon ile yıkayın.
Deterjan kalıntılarını gidermek için bölümü tampondan deiyonize edilmiş bir su karışımına aktarın.
Bölümü, tampon deiyonize su içeren bir slayt üzerine yerleştirin. Fazla sıvıyı çıkarın ve montaj ortamını ekleyin. Ardından, bir lamel yerleştirin ve sabitleyin.
Son olarak, kesit içindeki etiketli floresan proteini ifade eden astrositleri görselleştirmek için konfokal mikroskopi kullanın.
Başlamak için, 50 mililitrelik bir tüpe 1 mililitre% 10 Triton X ekleyerek ve tüpü TBS ile 50 mililitreye kadar doldurarak taze bir TBST çözeltisi hazırlayın. K
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin