JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:55 dk. • July 8th, 2025
Donmuş sıçan beyin dokusunun bir bölümünü çözün.
Tampon ekleyin ve dokuyu kıyın. Daha sonra tampon içeren bir tüpe aktarın ve karıştırın.
Karışımı santrifüjleyin ve süpernatanı atın.
Dokuya proteolitik bir enzim çözeltisi ekleyin ve geniş çaplı bir pipet kullanarak yeniden süspanse edin.
Hücre dışı matrisi parçalamak için karışımı inkübe edin ve nöral hücreleri gevşetin.
Karışımı santrifüjleyin ve süpernatanı atın.
Doku parçalarını soğutulmuş bir tamponda yeniden süspanse edin ve hücreleri ayırmak için tekrar tekrar pipetleyin.
Döküntülerin ve ayrışmamış hücrelerin çökelmesine izin verin, ardından tek hücreli süspansiyonu yeni bir tüpe aktarın.
Hücreleri buz gibi soğuk etanole aktarın ve karıştırın. Hücreleri sabitlemek ve geçirgen hale getirmek için onları kuluçkaya yatırın.
Süspansiyonu santrifüjleyin ve süpernatanı atın.
Daha fazla analiz için nöral hücreleri soğuk bir tamponda yeniden askıya alın.
Dokuyu kıymak için, numuneleri bir ila iki damla tampon A çözeltisiyle kaplamadan önce numunelerin soğuk bir cam plaka üzerinde en fazla 1 dakika çözülmesine izin verin. Daha sonra, bir tıraş bıçağını plakaya tamamen dikey tutarak, dokuyu her ortogonal yönde 100 kez kıyın. Dokuyu iyic
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin