ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner incelemesi tarafından gözden geçirilmiştir.
Not: Hedef fare popülasyonunu belirleyerek başlayın. Önceki çalışmalarda, sadece erkek vahşi tip C57 / Bl6 fareleri kullanılmıştır. Bununla birlikte, çeşitli transgenik veya nakavt fareler de kullanılabilir. Stereotaktik koordinatların C57/Bl6 anatomisine dayandığını unutmayın. Her kullanıcının başlangıçta konturun beyaz maddeye lokalizasyonunu doğrulaması önerilir. 
 1. Beyaz Madde Strok İndüksiyonu - Medial Açılı Yaklaşım
<ol>
	<li>Distal çapı 15-25 μm arasında olan 0,5 mm'lik bir kılcal tüp kullanarak çekilmiş bir cam pipet hazırlayarak başlayın.</li>
	<li>Steril% 0.9 normal salin içinde 27.4 mg / ml'de (130 μM) steril 10 μl L-Nio (N (5) - (1) -iminoetil-L-ornitin hidroklorür) hazırlayın. </li>
	<li>Çekilen cam pipeti küçük bir hacimde L-Nio (2-5 μl) ile önceden doldurun ve cam pipeti bir vakum hattına bağlı boruya takın. Pipeti tezgahın üzerine düz bir şekilde yerleştirin ve çekilen ucu L-Nio solüsyonuna yerleştirin.
	<ol>
		<li>Pipetin 2 mm'lik kısmının en az 0.5 mm'si dolana kadar vakumu uygulayın. Vakumu kapatın ve pipeti geri çekin. Adım 1.12'ye kadar bir kenara koyun. </li>
	</ol>
	</li>
	<li>Fareyi bir indüksiyon odasına yerleştirin ve bir buharlaştırıcıdan (5 L / dk oksijen ve 0.5 L / dk nitrojen ile solunan 5 L / dk) akan standart% 32 izofluran kullanarak farenin anestezisini 1 dakika boyunca veya derin anestezi uygulanana kadar indükleyin. Fareyi stereotaktik mikroskop ile donatılmış stereotaktik bir cihaza aktarın. Bir buharlaştırıcıdan (5 L / dak oksijen ve 0.5 L / dak nitrojen ile solunan 2 L / dak) ve bir burun konisinden akılan% 32 izofluran kullanarak idame anestezisi sağlayın. Anestezi derinliğini bir ayak parmağı tutamıyla kontrol edin. </li>
	<li>Enjeksiyon kolunu 36°'ye ayarlayın. </li>
	<li>Düşük hacimli basınçlı enjeksiyon sisteminin distal ucuna çekilmiş bir cam pipet tutucu takın ve stereotaktik kurulumun enjeksiyon koluna takın. </li>
	<li>Anestezi uygulanmış hayvanın bıyıklarını vazelin ile kaplayın ve her iki gözün üzerine suni gözyaşı merhemi sürün. Başın üzerinde 5-10 cm'lik bir açıklık olacak şekilde hayvanın başının üzerine steril bir örtü yerleştirerek steril bir cerrahi alan hazırlayın. Kafatasının üzerindeki kürkü tıraş ederek aseptik bir cerrahi yüzey hazırlayın. Saç derisini alternatif betadin ve% 70 alkollü bezlerle temizleyin. </li>
	<li>Kafatası yüzeyini ortaya çıkarmak için steril ince makasla 1,5 cm'lik orta hat kafa derisi kesisi yapın. Kafatasını steril bir pamuklu çubukla kurulayın ve 1-3X büyütmede stereotaktik bir mikroskop kullanarak, steril bir mikro nokta aleti kullanarak üstteki periosteal dokuyu çıkarın. </li>
	<li>İnce nokta işaretleyicisi kullanarak Bregma'yı referans noktası olarak işaretleyin. </li>
	<li>Bregma'dan arkaya doğru başlayan ve orta hattın hemen solunda öne doğru uzanan steril, ince uçlu bir cerrahi matkap ucu kullanarak 2 mm'lik bir eliptik kraniotomi delin. Serebral korteksin görüntülenebilmesi için kemik parçalarını ve üstteki yumuşak dokuyu çıkarın. </li>
	<li>Aralıklı olarak steril salin damlaları uygulayarak cerrahi alanı ve kortikal yüzeyi nemli tutun. </li>
	<li>Stereotaktik aparatın enjektör koluna çekilmiş bir cam pipet takın. Pipetin distal ucunu Bregma ile hizalayın ve stereotaktik koordinatları sıfırlayın. </li>
	<li>Pipeti Tablo 1'da verilen ilk ön/arka (A/P) ve medial/lateral (M/L) koordinatlarına ilerletin. </li>
	<li>Pipeti kortikal yüzeye ilerletin ve dorsal/ventral (D/V) ölçümünü sıfırlayın. </li>
	<li>Tablo 1'deki ilk D/V koordinatına ulaşana kadar pipeti yavaşça beyne geçirin. </li>
	<li>20 msn darbeler için 20 psi'ye ayarlanmış düşük hacimli bir basınçlı enjeksiyon sistemi kullanarak, beyne 100 nl L-Nio enjekte edin ve pipet yolunda geri akışı önlemek için 5 dakika bekleyin.
	<ol>
		<li>Stereotaktik mikroskobun göz merceğinde kalibre edilmiş bir retikül ve 3X büyütme kullanın.</li>
		<li>Buna göre, her koordinat seti için çekilen cam pipetten toplam 0,100 mm3 (0,5 mm çapında bir pipette 0,5 mm uzunluk, 100 nl'ye karşılık gelir) yer değiştirin. Bir retikül kullanarak, her kurulum kullanılan büyütme ve ölçeklere bağlı olarak değiştiğinden ölçün ve standartlaştırın. </li>
		<li>Her enjeksiyon sırasında doğru hacim ölçümü için, hava sıvısı menisküsünün sagital bir görünüme sahip olması için mikroskopla açılı pipete yandan yaklaşın. Menisküs, pipetin hem iç hem de dış duvarlarının aynı odak düzleminde görünmelidir. </li>
	</ol>
	</li>
	<li>Pipeti yavaşça geri çekin ve Tablo 1'da verilen ikinci ve üçüncü koordinat kümesinde 1.13-1.16.3 adımlarını tekrarlayın. </li>
	<li>Son enjeksiyondan sonra, pipeti çıkarın ve kraniyotomi bölgesini dolduracak kadar kemik mumu yerleştirin. Kafa derisinin kenarlarını yaklaşık olarak yaralayın ve dermal yapıştırıcı ile bağlayın. </li>
	<li>Kafa derisi insizyonu ile ilişkili lokal ağrıyı önlemek için steril bir 30 G iğne kullanarak yara kenarlarına 0.1 ml% 0.5 Marcaine enjekte edin. </li>
	<li>Hayvanı yuvasına geri koyun ve 5 gün boyunca içme suyuna ameliyat sonrası antibiyotikler (0.48 mg / ml trimetoprim-sülfametoksazol veya 0.5 mg / ml Levofloksasin) verin. </li>
</ol>
<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/23254/23254eq01.jpg" style="margin: auto;">

Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmemiştir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>L-N5-(1-İminoetil)ornitin, dihidroklorür</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>400600-20MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>İzofluran</td>
			<td>Phoenix İlaç A.Ş.</td>
			<td>NDC 57319-559-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kılcal borular</td>
			<td>Dünya Hassas Aletleri</td>
			<td>50-821-807</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Picospritzer</td>
			<td>Parker Enstrümantasyonu</td>
			<td>Picospritzer II</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereotaktik kurulum</td>
			<td>Kent Bilimsel</td>
			<td>KSC51725</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipet çekici</td>
			<td>KOPF</td>
			<td>Model 720</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomikroskop SZ51</td>
			<td>Olimpos Okyanusu</td>
			<td>88-124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>İnce makas</td>
			<td>İnce Bilimsel Araçlar</td>
			<td>14084-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forseps</td>
			<td>Harvard Aygıtı</td>
			<td>PY2 72-8547</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kavisli forseps</td>
			<td>Harvard Aygıtı</td>
			<td>PY2 72-8598</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Künt diseksiyon aracı</td>
			<td>İnce Bilimsel Araçlar</td>
			<td>10066-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matkap</td>
			<td>Dremel</td>
			<td>8220-1/28</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matkap uçları</td>
			<td>İnce Bilimsel Araçlar</td>
			<td>19007-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetbond</td>
			<td>3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Marcaine</td>
			<td>HOSPIRA</td>
			<td>NDC 0409-1610-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trimetoprim-sülfametaksol</td>
			<td>STI Eczanesi</td>
			<td>NDC 54879-007-16</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

bir nitrik oksit inhibitörü kullanarak bir murin modelinde beyaz cevher inmesinin indüklenmesi

Kaynak: Nunez, S., et al. <a href="https://app.jove.com/v/53404">Aksonal Dejenerasyon ve Beyaz Madde Nörobiyolojisi Çalışması için Subkortikal Beyaz Madde İnmesinin Çok Yönlü Bir Murin Modeli. </a> J. Vis. Uzm. (2016)
Bu video, beyaz madde içinde hedeflenen beyin koordinatlarına bir nitrik oksit inhibitörü enjekte ederek anestezi uygulanmış bir farede beyaz madde inmesini indüklemek için kesin tekniği göstermektedir. Bu, kan damarı daralmasına ve kan akışının engellenmesine yol açarak nöronal hasara ve beyin felci ile sonuçlanır.

Bir nitrik oksit inhibitörü kullanarak bir murin modelinde beyaz cevher inmesinin indüklenmesi

Source: Nunez, S., et al. A Versatile Murine Model of Subcortical White Matter Stroke for the Study of Axonal Degeneration and White Matter Neurobiology. ...

Açıkta kalan bir kafatası ile stereotaktik bir çerçevede hareketsiz hale getirilmiş anestezi uygulanmış bir fare ile başlayın.
Bregmayı işaretleyin, ardından bregmadan arkaya doğru başlayıp orta hattın hemen soluna öne doğru uzanan bir delik açın.
Miyelinli akson açısından zengin serebral korteksi ortaya çıkarmak için doku katmanlarını çıkarın ve doku kurumasını önlemek için tuzlu su damlaları uygulayın.
Nitrik oksit inhibitörü ile doldurulmuş bir pipeti, hassas enjeksiyon için belirli bir açıyla yerleştirilmiş bir enjektör koluna takın.
Stereotaktik koordinatları ayarlayın ve geri akışı önlemek için pipeti kısa bir süre tutarak inhibitörü serebral korteksin beyaz maddesine enjekte edin.
Enjeksiyonu geri çekin ve diğer koordinatlarda tekrarlayın.
Daha sonra deliği kapatın ve kesiği yapıştırıcı ile kapatın.
İnhibitörler, kan damarı endotel hücrelerinde nitrik oksit üreten enzimlere bağlanarak nitrik oksit üretimini inhibe eder ve kan damarlarını daraltır.
Bu daralma kan akışını engeller, nöronal hasara ve lezyon oluşumuna yol açarak beyaz cevher felci geliştirir.

Önce çekilmiş bir cam pipeti bir vakum hattına bağlı boruya takarak başlayın. Çekilen ucu L-Nio solüsyonuna veya L-Nio plus floresan izleyiciye yerleştirin. Vakumu başlatın ve pipetin 0,5 milimetre çapındaki kısmının en az 2 milimetresi dolana kadar emme uygulayın.
Doldurulmuş pipeti bir kenara koyun. Ardından, fareyi stereotaktik mikroskop ile donatılmış bir stereotaktik aparata yerleştirin. Fareyi onaylanmış prosedürlere göre uyuşturduktan ve ameliyata hazırladıktan sonra, anestezi derinliğini bir ayak parmağı tutamıyla kontrol edin. Yanıt verilmemelidir.
Ardından, enjeksiyon kolunu 36 dereceye ayarlayın. Düşük hacimli basınçlı enjeksiyon sisteminin distal ucuna çekilmiş bir cam pipet tutucu takın ve enjeksiyon koluna takın. Kafatasını ortaya çıkarmak için 1,5 santimetrelik orta hat kafa derisi kesisi yaptıktan sonra, yüzey kafatasını pamuklu çubukla kurulayın.
Ardından, 1 ila 3X büyütmede stereotaktik bir mikroskoptan bakarken, üstteki periosteal dokuyu çıkarmak için bir mikro nokta aleti kullanın. Bregma'yı ince bir nokta işaretleyici ile işaretleyin, ardından 2 milimetrelik eliptik bir kraniotomi delmek için ince uçlu bir cerrahi matkap ucuyla donatılmış bir cerrahi matkap kullanın, bregma'dan posteriordan başlayın ve orta hattın hemen solunda öne doğru uzanın.
Serebral korteksin görüntülenebilmesi için kemik parçalarını ve üstteki yumuşak dokuyu çıkarın. Aralıklı olarak steril tuzlu su damlaları uygulayarak kortikal yüzeyi nemli tutun. Ardından, doldurulmuş pipeti enjektör koluna takın. Pipetin distal ucunu bregma ile hizalayın ve stereotaktik koordinatları sıfırlayın.
Tablo 1'de listelenen ön, arka ve medial lateral koordinatları kullanarak pipeti ilk enjeksiyon noktasına ilerletin. Ardından, pipeti kortikal yüzeye ilerletin ve dorsal ventral ölçümü sıfırlayın. Pipeti yavaşça dorsal ventral koordinata indirin.
Stereotaksik mikroskop büyütmesinin 3X olarak ayarlandığından ve kalibre edilmiş retikülün net bir şekilde görülebildiğinden emin olun. Hava sıvısı menisküsünün sagital bir görünüme sahip olması için açılı pipeti yandan görüntüleyin. Menisküs, pipetin hem iç hem de dış duvarının aynı odak düzleminde görünmelidir.
Şimdi, 20 milisaniyelik darbeler için 20 PSI'ye ayarlanmış düşük hacimli bir basınçlı enjeksiyon sistemi kullanarak, beyne 100 nanolitre L-Nio enjekte edin. Toplam hacmi enjekte ettikten sonra, pipet izinin geri akışını önlemek için 5 dakika bekleyin. Ardından, pipeti geri çekin ve enjeksiyon prosedürünü tablo 1'de verilen ikinci ve üçüncü koordinat setinde tekrarlayın.
Son enjeksiyondan sonra, pipeti çıkarın ve kraniyotomi bölgesini dolduracak kadar kemik mumu yerleştirin. Son olarak, kafa derisi yarasının kenarlarını yaklaşık olarak inceleyin ve dermal yapıştırıcı ile bağlayın.

inducing-white-matter-stroke-murine-model-using-nitric-oxide

Research

JoVE Encyclopedia of Experiments

Neuroscience

Sinirbilim

Neuropathology

Nöropatoloji

Cerebrovascular Diseases

Serebrovasküler Hastalıklar

Inducing White Matter Stroke in a Murine Model Using a Nitric Oxide Inhibitor

Difüzyon tensör görüntüleme (DTG) görsel yolunun büyük parçalar tasvir etmeye yapıldı. Amaç FDA hastalarda görme yolunun postoperatif hasarı azaltmak için denemek için günlük rutin için standart olarak kullanılan ticari iş istasyonu onaylı kullanmak olmuştur.

Görsel yola¤ DTI - Beyaz Cevher Yollar ve Serebral Lezyonlar

Bu el yazması kapsül enfarktüs bir modelleme tekniği anlatılmaktadır. Burada ön ameliyat hedef haritalama sonra ışık düşük yoğunluğu ile modifiye Fototrombotik tekniği kullanılmıştır. Bu tekniği kullanarak, biz kalıcı motorlu bozukluğu olan bir sınırlı kapsül infarkt modeli yarattı.

Bir FOTOTROMBOTİK Tekniği sınırlı Kapsül Enfarktüs Modelleme

İnme, minimal tedavi seçenekleri olan ve kaybedilen beyin dokusunu yenilemek için mevcut klinik tedavinin olmadığı küresel bir sorundur. Burada kemirgenlerin motor korteksinde hassas fototropotik inme oluşturma yöntemlerini ve daha sonra inmeden sonra doku yenilenmesi üzerindeki etkilerini incelemek için hidrojel biyomalzemelerin enjeksiyonunu açıklıyoruz.

İnme Sonrası Beyne Hidrojel Biyomalzeme İskelelerinin Enjeksiyonu

Farelerde intraluminal orta serebral oklüzyon modeli sunuldu. Serebral infarkt ölçüde bir nörolojik skoru ve cresyl violet boyama, TTC alternatif boyama, paralel birçok ilgi belirteçleri test etmek büyük avantajı sunarak değerlendirilir.

Intraluminar MCAO Mouse Model: kresil Violet Boyama tarafından Serebral İnfarktı Değerlendirilmesi

Bu video, sağ ortak karotis arteri bloke ederek ve fareyi düşük oksijenli bir ortama maruz bırakarak bir fare modelinde trombotik bir inmeyi çoğaltma prosedürünü göstermektedir. Bu işlem beyne giden kan ve oksijen akışını azaltarak kan pıhtısı oluşumuna ve beyin hasarına neden olur.

Bir fare modelinde hipoksi ve iskemi yoluyla trombotik inme inmesinin indüklenmesi

Orta serebral arter oklüzyonu (MCAO) çeşitli kemirgen modelleri yaygın deneysel beyin araştırmalarda kullanılır. Burada, insan iskemik strok çoğunluğu tarafından uygulanan zarar tekabül eden bir boyutta tutarlı bir kortikal enfarktüs üreten transkraniyal sürekli uzak MCAO modelini göstermektedir.

Farelerde Modelleme İnme: Distal Orta Serebral Arter Daimi Pıhtılaşma

Burada, geri dönüşümsüz bir endotelyal nitrik oksit sentaz (eNOS) inhibitörünün (L-Nio) lokal enjeksiyonu ile murin beyaz cevherinde fokal inme üretimi için metodoloji sunuyoruz. Bu tekniğin potansiyel uygulamalarını genişleten iki stereotaktik varyasyon, retrograd nöronal izleme ve taze doku etiketleme ve diseksiyon sunulmaktadır.

Aksonal Dejenerasyon ve Beyaz Cevher Nörobiyoloji Çalışması Çok Yönlü Fare Modeli subkortikal beyaz madde İnme

Silikon kaplı bir sütür kullanılarak orta serebral arterin tıkanmasıyla inen bir fare inme modelini tarif ediyoruz. Protokol, kalıcı oklüzyon veya geçici bir iskemiyi indüklemek için uygulanabilir ve ardından reperfüzyon uygulanabilir.

Enfarktüs Bölgesi Orta Arter Tıkanıklığı Tekniği ve Görselleştirme kullanma Fare İskemik İnme ve İskemi-reperfüzyon indüksiyon

Intraluminal filaman tıkanıklığı orta serebral arter deneysel kontur rodents en sık kullanılan vivo içinde modeldir. Ortak karotid arter onarım izin vermek için başka bir cerrahi yaklaşım burada, reperfüzyon ortak karotid arter ve orta serebral arter bölge tam bir reperfüzyon veren gerçekleştirilir.

Orta serebral arter tıkanıklığı ortak karotid arter onarım ile reperfüzyon farelerde izin

Deneysel inme araştırmalarında orta serebral arter tıkanma (MCAo) farklı modelleri kullanılmaktadır. Burada, serebrovasküler trombüsin spontan pıhtı lizisi veya tedavisi nedeniyle çıkarıldığı insan inmesini taklit etmeyi amaçlayan dış karotis arter (ECA) yoluyla geçici MCAo'nun deneysel bir inme modeli tanımlanmıştır.

Farelerde Modelleme İnme: Dış Karotid Arter yoluyla Geçici Orta Serebral Arter Tıkanıklığı

Öğrenin, beyaz cevher inmesi oluşturmak için fare modelinde nitrik oksit inhibitörü enjeksiyonu yöntemini. Stereotaktik çerçeve kullanılarak beyin korteksine L-Nio uygulanır ve nöronal hasar incelenir.