Bir Fare Modelinde Tekrarlayan Beyin Sarsıntılı Kafa Yaralanmalarının Modellenmesi

Darbe ucunu ve prob ucunu bir darbe cihazına takarak başlayın.

Ardından, anestezi uygulanmış bir fareyi stereotaksik bir çerçeveye sabitleyin.

Darbe ucunu, kulaklar arasında hayali bir yatay çizgi ile dikey olarak hizalanacak şekilde interfrontal ve lambdoid sütürler arasına yerleştirin.

Uçları değiştirirken darbe merkezi kaymasını önlemek için stereotaksik kontrol panelindeki X ve Y kanallarını sıfırlayın.

Prob ucunu manuel olarak çarpma merkezine getirin ve çarpma bölgesine değecek şekilde indirin. Farenin kuyruğuna bir temas sensörü takın.

Z kanalını sıfırlayın, ardından X ve Y sıfır olana ve Z eksi dört okuyana kadar darbe ucunu yeniden konumlandırın.

Darbeyi belirli bir hızda uygulayın.

Yaralanmanın şiddetini belirlemek için apneyi (çarpmadan farenin ilk nefesine kadar geçen süre) ölçün.

Farenin kurtarmasına izin ver.

Etkiyi belirtilen aralıklarla tekrarlayın. Tekrarlanan darbeler beyindeki kan damarlarını yırtar, mikro kanamalara neden olur ve astrosit aktivasyonunu tetikleyerek hafif bir insan sarsıntısını taklit eder.

Elektromanyetik stereotaksik darbe cihazına özel yapım silikon kauçuk kaplı metal uç takarak başlayın. Kaplanmış ucun düz tabanının darbe cihazı prob ucunun yüzeyine paralel olmasına dikkat edin. Ardından, anestezi uygulanmış bir fareyi bir ısıtma yastığının üzerine yüzüstü pozisyonda yerleştirin ve ayak parmağınızın sıkışmasına yanıt verilmediğini onaylayın.

Ardından, kafayı tamamen tıraş etmek için bir saç düzeltici kullanın ve hayvanın gözlerine merhem sürün. Hayvan hazır olduğunda, kontrol kutusunda çarpma cihazının hızını saniyede 4 metreye ve bekleme süresini 240 milisaniyeye ayarlayın. Vücut ısısını 39 santigrat dereceye yakın tutmak için hayvanın vücudunun altına yumuşak bir ısıtma yastığı yerleştirin.

Ardından, fareyi stereotaktik çerçeveye yüzüstü pozisyonda monte etmek için künt uçlu kulak çubuklarını kullanın. Darbe ucunu farenin kafasına yakın bir yere indirmek için z sürücüsünü kullanın. X ve y sürücülerini, hedef koordinatların ortasında, sagital sütürün üzerine hareket ettirin ve düz darbe 9 milimetre çapındaki ucu ayarlayın.

Darbe ucunun bir kenarının, iki kulak arasına çizilen hayali bir yatay çizgiye dikey olarak paralel olmasına dikkat edin. Darbe derinliğini doğru bir şekilde ayarlamak için önce dijital stereotaksik kontrol panelindeki x ve y kanallarını sıfıra ayarlayın, böylece uçları değiştirdikten sonra darbe merkezinde kayma olmadığından emin olun.

Ardından, ek prob ucunu farenin beyninin çarpma bölgesine hareket ettirin. Prob ucunu çarpma alanının merkezine hareket ettirmek için x ve y sürücülerini manuel olarak ayarlayın ve kuyruğa bir temas sensörü klipsleyin. Prob ucu çarpma bölgesinin yüzeyine temas edene kadar çarpma tertibatını aşağı hareket ettirmek için z sürücüsünü kullanın ve stereotaksik kontrol panelindeki z kanalını sıfıra ayarlayın.

Ardından, x ve y sürücüleri sıfır olana kadar darbe ucunu manuel olarak etki alanına geri taşımak için x ve y sürücülerini kullanın. Ardından, z sürücüsünü gösteren kontrol paneli eksi 4.00'e gelene kadar z sürücüsünü aşağı doğru hareket ettirin. Aktüatörü geri çekmek için kontrol kutusundaki geri çekme anahtarını hareket ettirin.

Şimdi, 4 milimetre deformasyon derinliğine sahip bir darbeyi tetiklemek için kontrol kutusundaki darbe anahtarına tıklayın ve darbeden farenin ilk nefesine kadar geçen süreyi ölçmek için bir zamanlayıcı kullanın. Ardından, hayvanı tamamen iyileşene kadar izleyerek ılık bir pede aktarın.