Tümör Hücresi İstilasının Üç Boyutlu Küresel Modelinin Oluşturulması

JoVE Encyclopedia of Experiments

Sinirbilim

0 görüntüleme • 3:18 dk • April 28th, 2025

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

İnsan beyni tümör hücrelerinin bir kültürünü alın.

Hücre bağlantılarını bozmak, kümelenmiş hücreleri ayırmak için bir ayrışma enzimi ile tedavi edin.

Enzim aktivitesini durdurmak için bir tamponla yıkayın, ardından hücre canlılığını korumak için bir kültür ortamı ekleyin.

Bir süspansiyon maddesi olan metilselülozu tanıtın.

Süspansiyonu yuvarlak tabanlı bir mikro plakaya aktarın ve inkübe edin.

Viskoz metilselüloz, hücreleri askıda tutar ve sferoidler halinde agregasyon için hücre-hücre etkileşimlerini teşvik eder.

Sferoidleri, fizyolojik hücre dışı ortamı taklit eden bir kollajen matrisi ile karıştırın.

Süspansiyonu bir mikroplakaya aktarın ve inkübe edin, matrisin sferoidleri yakalayan bir jel oluşturmasına izin verin.

Büyüme ortamını jelin üzerine ekleyin.

Küresel periferde, tümör hücreleri hücre-hücre adezyonunu kaybeder ve invaziv bir fenotip benimser.

Bu hücreler matrisi bozmak için proteazlar salgılar, kendilerini sabitlemek için çıkıntıları uzatır ve matrisi istila ederek ilerlerler.

Tümör invazyonunu sergileyen küresel model analiz için hazır.

Düzgün boyutlu tümör sferoidleri oluşturmak için, önce ilgilenilen tümör hücre kültürünü 5 mililitre PBS ile yıkayın ve hücreleri 0.5 ila 1 mililitre ayrışma enzimi ile tedavi edin. 37 santigrat derecede 5 dakika sonra, 4 ila 4.5 mililitre PBS ile reaksiyonu durdurun ve ayrılan hücreleri 10 mililitre tam büyüme ortamı içeren 15 mililitrelik konik bir tüpe aktarın.

Saymadan sonra, hücreleri 2 mililitre% 2 metilselüloz konsantrasyonu ile desteklenmiş 8 mililitre tam büyüme ortamı başına 1 kez 10 ila 6 hücre arasında yeniden süspanse edin ve süspansiyonu steril bir sistem kabına aktarın. Daha sonra, 96 kuyucuklu yuvarlak bir alt plakanın her bir oyuğuna 100 mikrolitre hücre ekleyin ve plakayı üç ila dört gün boyunca 37 santigrat derece,% 5 karbondioksit inkübatörüne yerleştirin.

Bir invazyon testi yapmak için, tümör hücreleri eşit büyüklükte sferoidler oluşturduğunda, her hücre yapısını 500 mikrolitrelik bir tüpe aktarın ve sferoidleri bir kez 200 mikrolitre PBS ile yıkayın. İkinci yıkamadan sonra, sferoidleri dikkatlice 100 mikrolitre taze hazırlanmış kollajen matrisine aktarın ve her bir sferoid süspansiyonu düz tabanlı 96 oyuklu bir plakanın her bir oyuğunun ortasına ekleyin.

37 santigrat derecede 30 dakikalık bir inkübasyondan sonra, her bir oyuktaki jelin üzerine 100 mikrolitre tam büyüme ortamı ekleyin.

Tümör hücresi istilasının en iyi görüntülenmesi için tüm sferoidleri her kuyucuğun merkezine yerleştirdiğinizden emin olun.

08:49

3D Organotypic Melanom küresel Cilt modeli

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:33

Hücre viability ve ölüm kanser hücrelerinin 3D Küroid kültürlerde değerlendirilmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:20

Tümör-Stroma Etkileşimi ve İlaç Keşfini İncelemek İçin Yeni Bir Stromal Fibroblast-Modüle 3D Tümör Küresel Modeli

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:18

TGF-β-kaynaklı Invasion Tedbir Sfero Testi

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:02

Tümör Sferoidlerinde Sızan T Hücrelerinin Üç Boyutlu Ko-Kültür Modeli

İlgili videolar

0 Görüntüler

12:19

Üç boyutlu (3D) Tümör Sfero Yayılması deneyindeki

İlgili videolar

0 Görüntüler

05:34

Bir Kanseri Hücre Sfero Testi 3D ortamda Invasion Değerlendirmek için

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:15

Üç boyutlu Küroid Istilası tahlil tam ınsan tümör tabanlı matris

İlgili videolar

0 Görüntüler

06:27

Kanser Ilişkili fibroblastlar farklılaşma ve Invazyon In vitro etütler için daha fizyolojik bir sistem olarak bir 3D Küroid modeli

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:40

Glioblastoma için 3D Spheroid Model

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 15 Ağustos 2026