Tümör Hücresi İstilasının Üç Boyutlu Küresel Modelinin Oluşturulması
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:18 dk. • April 28th, 2025
İnsan beyni tümör hücrelerinin bir kültürünü alın.
Hücre bağlantılarını bozmak, kümelenmiş hücreleri ayırmak için bir ayrışma enzimi ile tedavi edin.
Enzim aktivitesini durdurmak için bir tamponla yıkayın, ardından hücre canlılığını korumak için bir kültür ortamı ekleyin.
Bir süspansiyon maddesi olan metilselülozu tanıtın.
Süspansiyonu yuvarlak tabanlı bir mikro plakaya aktarın ve inkübe edin.
Viskoz metilselüloz, hücreleri askıda tutar ve sferoidler halinde agregasyon için hücre-hücre etkileşimlerini teşvik eder.
Sferoidleri, fizyolojik hücre dışı ortamı taklit eden bir kollajen matrisi ile karıştırın.
Süspansiyonu bir mikroplakaya aktarın ve inkübe edin, matrisin sferoidleri yakalayan bir jel oluşturmasına izin verin.
Büyüme ortamını jelin üzerine ekleyin.
Küresel periferde, tümör hücreleri hücre-hücre adezyonunu kaybeder ve invaziv bir fenotip benimser.
Bu hücreler matrisi bozmak için proteazlar salgılar, kendilerini sabitlemek için çıkıntıları uzatır ve matrisi istila ederek ilerlerler.
Tümör invazyonunu sergileyen küresel model analiz için hazır.
Düzgün boyutlu tümör sferoidleri oluşturmak için, önce ilgilenilen tümör hücre kültürünü 5 mililitre PBS ile yıkayın ve hücreleri 0.5 ila 1 mil
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin