JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:42 dk. • April 28th, 2025
Açıkta kalan bir common carotis arter veya CCA ile anestezi uygulanmış bir fare ile başlayın.
CCA, yüze kan sağlayan dış karotis artere veya ECA'ya ve beyne kan sağlayan iç karotid artere veya ICA'ya çatallanır.
İlk olarak, ECA'nın etrafına bir dikiş yerleştirin ve sıkın.
Ardından, kan akışını engellemek için enjeksiyon bölgesinin altındaki CCA'ya sıkı bir dikiş ekleyin. <
p style='margin-left:36pt;'>Destek için CCA'nın altına nemli bir kağıt şeridi yerleştirin.Enjeksiyon bölgesinin üzerine gevşek bir düğüm yerleştirin, ardından kanser hücrelerini CCA'ya enjekte edin.
Dikişli ECA nedeniyle, hücreler beyne ulaşmak için ICA'ya gider.
Enjeksiyondan sonra, iğneyi çıkarın ve geri akışı önlemek için CCA'nın distal düğümünü sıkın. <
p style='margin-left:36pt;'>Son olarak, dikişleri kesin, şeridi çıkarın, tuzlu su ile durulayın ve yarayı kapatın.Zamanla, göç eden kanser hücreleri çoğalır ve beyinde tümörler geliştirir.
İnce forsepsleri dış karotis arterin altına yerleştirin ve arterin altına 5-0 ipek sütür geçirin. Düğümü atın ve dikişi sıkın ve fazla çizgiyi kesin. İnce forsepsleri ortak karotis arterin altına yerleştirin ve arterin altına 5-0 ipek sütür geçirin.
Bir düğüm atın ve dikişi önerilen enjeksiyon bölgesine yakın bir konumda sıkın. Fazla dikişi kesin ve çizginin yaklaşık 10 milimetresini bırakın. Yaklaşık 10 x 5 milimetrelik düşük tiftikli tek kullanımlık sileceklerden oluşan bir şeridi kesin ve nemlendirin.
Şeridi katlayın ve önerilen enjeksiyon bölgesinde karotis arterin altına yerleştirin. Bu, enjeksiyon sırasında damarı destekleyecektir. Önerilen enjeksiyon bölgesine ortak karotis arter rostral üzerine, gevşek bir düğüm ile üçüncü bir ligasyon yerleştirin. Bu sadece enjeksiyondan sonra sıkılır.
Hücre süspansiyonunu nazikçe çalkalayın ve 200 mikrolitre hücre süspansiyonunu 31 gauge iğne ile bir insülin şırıngasına çekin. Şırıngayı, etkinleştirilen bir ayak pedalına bağlı şırınga sürücüsüne yükleyin.
Şırıngaya 31 gauge iğne ile ince bir kanül takın ve çizgiyi astarlayın. Karotis arterin iyi konumlandırılıp konumlandırılmadığını ve basınçlı olup olmadığını kontrol edin. Biri birinci bağın ucuna hafifçe gerilen ve diğeri 31 gauge iğneyi tutan iki ince açılı forseps kullanarak, iğneyi eğim yukarı bakacak şekilde kan damarının lümenine yavaşça sokun ve delmemeye dikkat edin.
Daha önce hazırlanmış 100 mikrolitre hücre süspansiyonunu saniyede 10 mikrolitre hızla ana karotis artere yavaşça enjekte edin. Bu, kan damarına beşinci hücrelere 2,5 kez 10 kez verecektir. Başarılı enjeksiyon, karotis kan damarından kanın temizlenmesi yoluyla görselleştirilebilir.
Geri akışı ve kanamayı önlemek için iğneyi çektikten hemen sonra gevşek bağı nazikçe kaldırın ve sıkın. Fazla dikişleri kesin ve nemli, az tüy bırakan tek kullanımlık silecekleri çıkarın.
P200 pipet kullanarak, cerrahi boşluğu 150 ila 200 mikrolitre steril su veya tuzlu su ile iki kez durulayın. Kanama olup olmadığını kontrol ettikten sonra, yumuşak dokuyu, tükürük bezlerini ve cildi karotis arter ve trakea üzerine yeniden konumlandırın. Kesiğin cilt tabakasını bir dikiş iğnesi tutucusu, forseps ve sürekli bir düzende emilebilir veya emilmeyen bir 6-0 monofilament sütür kullanarak kapatın.